补骨脂素通过调控CD4~+T细胞分化抑制RAW264.7向破骨细胞分化和骨吸收
补骨脂素通过调控CD4~+T细胞分化抑制RAW264.7向破骨细胞分化和骨吸收
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DOI：
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
厉宇红
中科院分区：
文献类型：
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作者：
李劲平;谢保平;章文娟;石丽颖;李伟娟;曾英;甘国兴;厉宇红
探讨补骨脂素(psoralen)是否通过调控CD4~+T细胞分化抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收作用,初步阐明补骨脂素抗骨质疏松作用的骨免疫学机制。采用免疫磁珠分选法从Balb/c小鼠脾脏细胞分离制备CD4~+T细胞,分为空白组和补骨脂素组接种于24孔板,加入补骨脂素诱导培养3 d,第4天收集各组细胞用于共培养实验。共培养实验分为RAW264.7细胞组(a组)、RAW264.7细胞+psoralen~-CD_4~+T细胞组(b组)、RAW264.7细胞+补骨脂素组(终浓度为10 μmol·L~(-1),c组)、RAW264.7细胞+psoralen~+ CD4~+T细胞组(d组)等4组,共培养5 d后,TRAP染色检测破骨细胞数目,共培养8 d后,骨片用甲苯胺蓝染色评价骨吸收情况,RT-PCR检测CD4~+T细胞RORγt,Foxp3,IL-17,TNF-α,TGF-β和IL-10等基因的表达,以及破骨细胞相关基因MMP-9,TRAP和Cat-K的表达,ELISA试剂盒检测IL-17,TNF-α,TGF-β和IL-10等细胞因子的水平。结果显示,补骨脂素显著促进CD4~+T细胞的Foxp3,TGF-β和IL-10的表达,抑制CD4~+T细胞的RORγt,IL-17和TNF-α的表达。psoralen~-CD_4~+T细胞能显著促进RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化,psoralen~+ CD4~+T细胞能显著抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收作用。补骨脂素通过促进CD4~+T细胞中CD4~+CD25~+Treg/Th17平衡向CD4~+CD25~+Treg发展,从而抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收作用。