靶向声敏纳泡的制备及其声动力效应观察
靶向声敏纳泡的制备及其声动力效应观察
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DOI：
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
周青
中科院分区：
文献类型：
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作者：
陈粤瑛;王浩;胡玉刚;黄鑫;陈金玲;邓倾;曹省;潘桔红;周青
目的制备以动脉粥样硬化斑块A类清道夫受体(SR-A)为靶点的载二氢卟吩e6(Ce6)超声纳泡(NB),探讨其提高声敏剂的靶向性及声动力效应的能力。方法以薄膜水化法制备载Ce6和SR-A靶向多肽PP1的纳泡(Ce6-PP1 NB),检测其理化性质和细胞毒性。将小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)分别与Ce6、Ce6-PP1 NB共同孵育,采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞内Ce6荧光强度以评估Ce6-PP1 NB的靶向性。将细胞按照不同处理方法分为:空白对照组(加入磷酸盐缓冲液)、低强度脉冲超声(LIPUS)组(加入磷酸盐缓冲液后予以超声辐照)、Ce6+LIPUS组(加入30 μg/ml Ce6后予以超声辐照)和Ce6-PP1 NB+LIPUS组(加入30 μg/ml Ce6-PP1 NB后予以超声辐照),超声辐照参数为:0.4 W/cm~2、2 MHz,辐照时间1 min。采用活性氧荧光探针法检测细胞内活性氧生成情况,流式细胞术检测M1型、M2型巨噬细胞的比例,酶联免疫吸附测定法检测细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-10)浓度,评估Ce6-PP1 NB的声敏性和声动力效应。结果制备的Ce6-PP1 NB呈圆形,形态规则,分散均匀,平均粒径为(504.25±149.13)nm,平均Zeta电位为-(8.67±0.78)mV,Ce6包封率为(85.63±4.39)%,PP1连接率为(92.78±4.57)%。0、5、10、20、30 μg/ml的Ce6-PP1 NB与RAW264.7细胞共孵育12 h后,细胞存活率均>90%;当Ce6-PP1 NB浓度达40 μg/ml时,细胞存活率明显下降(P<0.01)。体外寻靶实验结果显示,与Ce6-PP1 NB共同孵育细胞内Ce6红色荧光强度明显高于与Ce6共同孵育细胞。Ce6-PP1 NB+LIPUS组细胞内出现明显绿色荧光,M1型巨噬细胞的比例减少,M2型巨噬细胞的比例增加,TNF-α、IL-6浓度均减小,IL-10浓度增大,与其余各组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Ce6-PP1 NB可提高声敏剂在动脉粥样硬化斑块的聚集和声动力效应。