Vorläufige Ergebnisse von Untersuchungen an eingefrorenen und bei tiefen Temperaturen bestrahlten Lymphozyten
Vorläufige Ergebnisse von Untersuchungen an eingefrorenen und bei tiefen Temperaturen bestrahlten Lymphozyten
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淋巴液温度升高和温度升高的影响
DOI：
10.1007/bf01190144
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发表时间：
1971
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
R. Grillmaier
中科院分区：
文献类型：
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作者：
R. Grillmaier
使用甘油作为保护剂，将人外周血淋巴细胞以低于1℃/分钟的速度冷却到凝固温度，以抵御冷冻的影响。在−10~−15℃下固化后，冷却至−22℃左右，其中一组样品解冻，其余样品通过浸入固体二氧化碳或液氮中快速冷却至−80或−196℃。冷冻细胞悬浮液的其他样品以3至5℃/分钟的冷却速度冷却到相同的温度要慢得多。在25℃水浴中快速解冻后，去除甘油中的细胞悬液，培养24或48小时，然后加入秋水仙碱停止有丝分裂。与对照组(未处理的未冷冻血浆)相比，在−22℃下冷冻、快速和缓慢降温至−79°C和缓慢降温至−196°C的样品，24 h后加入秋水仙碱的有丝分裂率较低，48 h后再加入秋水仙碱的有丝分裂率显著高于对照组(未处理的未冷冻血浆)。在−196℃快速冷冻的培养中，未发现中期分裂相。除快速冷冻至−196°C的培养物外，冷冻前后细胞浓度无显著差异，染色体畸变率未见明显增加。ZusammenfassungLymPhozytenkulturen可减少Zugabe von Glyzerin ALS Gefrierschutzinterz zunächst Gmeinsam Mit ungefähr 1°C/minAbkühlgeschwindigkeit bis zum vollnDigkeit Erstarren eingFroren and Dann MIT verschiedener Geschwindigkeit(∼22，−80 and−196°C)geht。所有的问题都是24小时的问题，48小时的问题是我们不能解决问题，也不能解决血浆问题。在Den Schnell auf−196°C abgekühlten Proben Wurden in beiden Fällen(24 h和48 h Kulturdauer)keine Metapaseplten gefunden。在−196°C下，库尔图伦有一片荒凉的绿地。这是一种非常重要的现象。
SummaryPeripheral human lymphocytes were cooled to the temperature of solidification at a rate of less than 1 °C/min using glycerol as a protective agent against the effects of freezing. After solidification at temperatures of −10 to −15 °C and cooling to about −22 °C one group of the samples was thawn and the others were cooled rapidly to −80 or −196 °C by immersion into solid carbon dioxide or liquid nitrogen. Other samples of the frozen cell suspension were cooled down to the same temperatures much slower at a cooling rate of 3 to 5 °C/min. After rapid thawing in a 25 °C water bath the cell suspensions were removed from glycerol and cultured for 24 or 48 h before stopping mitoses by adding colchicine. The samples frozen at −22 °C, the samples cooled both rapidly and slowly to −79 °C, and the ones cooled slowly to −196 °C showed a lower rate of mitosis when colchicine was added after 24 h and a significantly higher rate of mitosis after 48 h of incubation before adding colchicine as compared to the controls (untreated, unfrozen plasma). In the culture frozen rapidly to −196 °C no metaphases could be found. The cell concentrations before and after freezing showed no significant differences except those of the culture frozen rapidly to −196 °C. The chromosome aberration rate is not significantly increased.ZusammenfassungLymphozytenkulturen werden nach Zugabe von Glyzerin als Gefrierschutzsubstanz zunächst gemeinsam mit ungefähr 1 °C/min Abkühlgeschwindigkeit bis zum vollständigen Erstarren eingefroren und dann mit verschiedener Geschwindigkeit (∼ 200 °C pro min und 3 bis 5 °C/min) auf verschieden tiefe Temperaturen (−22, −80 und −196 °C) gebracht. Alle eingefrorenen Proben weisen nach 24 h Kulturdauer eine kleinere, nach 48 h Kulturdauer eine wesentlich höhere Mitoserate als die Kontrollgruppe (unbehandelte, nicht eingefrorene Plasmaproben) auf. In den schnell auf −196 °C abgekühlten Proben wurden in beiden Fällen (24 h und 48 h Kulturdauer) keine Metaphaseplatten gefunden. Die Zellkonzentrationen waren nur bei den schnell auf −196 °C abgekühlten Kulturen stark verringert. Die Chromosomenaberrationsrate der eingefrorenen Kulturen ist nicht signifikant erhöht.