The spaghetti overlay: simultaneous screening of multiple polyclonal and monoclonal antibodies by immunoautoradiography.
The spaghetti overlay: simultaneous screening of multiple polyclonal and monoclonal antibodies by immunoautoradiography.
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意大利面叠加：通过免疫放射自显影同时筛选多种多克隆和单克隆抗体。
DOI：
10.1016/0003-2697(82)90010-0
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发表时间：
1982
影响因子：
2.9
通讯作者：
Adair,WS
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Adair,WS
本文介绍了一种用微聚丙烯酰胺凝胶快速筛选多克隆和单克隆抗体的方法。将在体外或体内直接标记或通过与125 I标记的蛋白A形成缀合物而间接标记的抗体溶解在低熔点琼脂糖中并吸入微毛细管中。胶凝后，将管内容物以“泳道”形式施加到凝胶表面。短暂孵育后，取出抗体条，并通过电转移至DE-81上或通过洗涤实现脱色。该技术说明了多个多克隆和单克隆抗体筛选衣原体鞭毛蛋白。一个潜在的用途映射的抗原决定簇也证明了使用抗血清的60 K明胶结合肽的人血浆纤连蛋白，白细胞弹性蛋白酶释放，探针有限的溴化氰消化产生的亚片段。
A method for rapid screening of polyclonal and monoclonal antibodies using micropolyacrylamide gels is described. Antibodies, labeled directly in vitro or in vivo or indirectly by conjugate formation with125I-labeled protein A, are dissolved in low-melting-temperature agarose and drawn into microcapillary tubes. After gelling, tube contents are applied to the gel surface in “lanes.” Following a brief incubation, antibody strips are removed and destaining is achieved by electrotransfer onto DE-81 or by washing. The technique is illustrated by screening of multiple polyclonal and monoclonal antibodies against Chlamydomonas flagellar proteins. A potential use for mapping of antigenic determinants is also demonstrated using antisera to the 60K gelatin-binding peptide of human plasma fibronectin, released by leukocyte elastase, to probe subfragments generated by limited CNBr digestion.
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