Genetically encoded multimode reporter of adaptor complex 3 traffic in budding yeast.
Genetically encoded multimode reporter of adaptor complex 3 traffic in budding yeast.
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适配器复合物的遗传编码的多模记者3在发芽的酵母中流量。
DOI：
10.1111/tra.12772
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发表时间：
2021-01
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Merz AJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Plemel RL;Odorizzi G;Merz AJ
AP-3（适配器复合物3）介导从晚期高尔基体或早期内体到晚期内体隔室的运输。在哺乳动物中，AP-3的突变导致2型Hermansky-Pudlak综合征、周期性血小板减少症和一种形式的癫痫性脑病。在芽殖酵母中，AP-3将货物直接从高尔基体运送到溶酶体空泡。尽管该途径的重要性和二十年前的发现，AP-3突变体的快速筛选和选择尚未实现。我们现在报告GNSI，一种合成的，遗传编码的报告，允许快速板为基础的评估AP-3功能缺陷，使用显色或生长表型读出。该系统识别AP-3载体囊泡的形成和消耗中的缺陷，并且适用于板阵列和液体分批培养形式中的高通量筛选或选择。已将编码GNSI的附加型和整合型质粒提交至Addgene储存库。
AP-3 (adaptor complex 3) mediates traffic from the late Golgi or early endosomes to late endosomal compartments. In mammals, mutations in AP-3 cause Hermansky-Pudlak Syndrome type 2, cyclic neutropenias, and a form of epileptic encephalopathy. In budding yeast, AP-3 carries cargo directly from the trans-Golgi to the lysosomal vacuole. Despite the pathway’s importance and its discovery two decades ago, rapid screens and selections for AP-3 mutants have not been available. We now report GNSI, a synthetic, genetically encoded reporter that allows rapid plate-based assessment of AP-3 functional deficiency, using either chromogenic or growth phenotype readouts. This system identifies defects in both the formation and consumption of AP-3 carrier vesicles and is adaptable to high-throughput screening or selection in both plate array and liquid batch culture formats. Episomal and integrating plasmids encoding GNSI have been submitted to the Addgene repository.
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DOI：
10.1083/jcb.128.5.779
发表时间：
1995-03
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Vida TA;Emr SD
通讯作者：
Emr SD
影响因子：
64.5
作者：
JOHNSON, LM;BANKAITIS, VA;EMR, SD
通讯作者：
EMR, SD
影响因子：
7.5
作者：
Dell'Angelica, Esteban C.
通讯作者：
Dell'Angelica, Esteban C.
影响因子：
3.3
作者：
Lobingier BT;Merz AJ
通讯作者：
Merz AJ
影响因子：
14.8
作者：
通讯作者：
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