低氧通过上调内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)表达促进人K562细胞向红系分化

低氧通过上调内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)表达促进人K562细胞向红系分化
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DOI：
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发表时间：
2022
期刊：
细胞与分子免疫学杂志
影响因子：
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通讯作者：
李翠莹
李翠莹
中科院分区：
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文献类型：
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作者：
高瞻;肖军;李小薇;李翠莹

文献摘要

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目的探讨低氧条件下编码缺氧诱导因子2α(HIF-2α)的内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)基因在K562人红白血病细胞向红系分化中的作用。方法将K562细胞分为常氧对照组、常氧诱导组(40 μmol/L氯化血红素和0.1 ng/mL阿糖胞苷诱导)、低氧对照组(50 mL/L O2)、低氧诱导组。培养5 d后收集细胞,流式细胞术分析CD235a~+ CD71~+细胞比例,联苯胺染色检测血红蛋白合成, CCK-8法检测细胞增殖,实时定量PCR检测EPAS1、胰岛素受体底物2(IRS2)、γ珠蛋白(γ-globin)mRNA表达, Wester blot法检测上述基因蛋白表达,分析低氧对K562细胞红系分化的影响;使用短发夹RNA(shRNA)敲低EPAS1,分析常氧及低氧下实验组(sh-EPAS1组)和对照组(sh-Control)红系分化的差异,明确EPAS1对K562细胞红系分化的作用。结果与常氧诱导组相比,低氧诱导组CD235a~+ CD71~+阳性细胞显著增加,合成血红蛋白增多, EPAS1、γ-globin、IRS2表达明显上升,红系分化程度更高;与sh-Control相比, sh-EPAS1组CD235a~+ CD71~+阳性细胞减少,合成血红蛋白降低,细胞增殖能力下降, EPAS1、γ-globin、IRS2表达显著降低,红系分化受阻。结论低氧能显著上调K562细胞EPAS1表达,促进细胞向红系分化。