ZmAGO18b的原核表达载体的构建与表达
ZmAGO18b的原核表达载体的构建与表达
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DOI：
10.13417/j.gab.039.005647
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
翟立红
中科院分区：
文献类型：
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作者：
孙伟;任家鑫;腾峰;李知洪;翟立红
AGO18是禾本科植物中特有的Argonautes (AGOs)蛋白的一个分支,在植物生殖器官发育和逆境胁迫过程中发挥着重要的调控作用。玉米中AGO18b (ZmA GO18b)的表达具有很强的组织特异性,在雄穗小孢子减数分裂时期特异富集。为了研究ZmAGO18b基因的功能,本研究从减数分裂时期的玉米雄穗cDNA中特异扩增ZmAGO18b的全长ORF (2 760 bp),利用酶切连接的方法构建原核表达载体,通过大肠杆菌表达菌株(Transetta)进行IPTG诱导表达。结果显示,ZmAGO18b蛋白最佳诱导条件是IPTG终浓度0.10 mmol/L,诱导温度是37℃,诱导时间为3 h,此时体外表达的蛋白量达到最高,蛋白大小约为100 kD。本研究有助于后期对ZmAGO18b蛋白的分离与纯化,为进一步抗体制备及相关功能研究积累了有价值的资料。