弓形虫RH株调节JAK1-STAT6信号通路诱导人原代肺泡巨噬细胞极化的研究
弓形虫RH株调节JAK1-STAT6信号通路诱导人原代肺泡巨噬细胞极化的研究
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
赵志军
中科院分区：
文献类型：
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作者：
刘学雷;杨宁爱;康宇婷;杨红;康佳;周云花;苏雅静;赵志军
目的 探讨弓形虫感染人原代肺泡巨噬细胞的 特 点 以 及 调 节ＪＡＫ１－ＳＴＡＴ６信 号 通 路 对 人 肺 泡 巨 噬 细 胞 极 化的影响。 方法 收集肺癌患者肺泡灌洗液，分离纯化肺泡巨噬细胞并作细胞爬片处理，体外 选 择１∶１的 比 例 感 染 弓形虫并设置不同感染时间，Ｄｉｆｆ染色分析巨噬细胞内弓形 虫 的 增 殖 情 况。分 别 在 不 同 感 染 时 间 收 集 细 胞，提 取 全 蛋 白，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测信号通路蛋白的表达；Ｔｒｉｚｏｌ法提取 ｍＲＮＡ，反转录为ｃＤＮＡ 后采 用 Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ 检 测 相 关 ｍＲＮＡ的表达。 结果 成功分离并纯化得到肺 泡 巨 噬 细 胞 并 感 染 弓 形 虫。Ｄｉｆｆ染 色 显 示 弓 形 虫 可 在 肺 泡 巨 噬 细 胞 生 存 繁殖，从２４ｈ开始弓形虫繁殖力较为明显增强，３６ｈ时弓形虫数量显著增多并且从细胞内释放到细胞外。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测 Ｍ１型巨噬细胞信号通路蛋白ＳＴＡＴ１、Ｐ－ＳＴＡＴ１和 Ｐ－ＮＦ－κＢ呈先增高后降低的趋势，以 Ｐ－ＮＦ－κＢ先升高后增加的趋势尤为明显；Ｍ２型巨噬细胞信号通路ＪＡＫ１、ＳＴＡＴ６ 和 Ｐ－ＳＴＡＴ６信 号 通 路 蛋 白 也 呈 现 逐 渐 升 高 的 趋 势，ｉＮＯＳ的表 达呈显著降低的趋势，Ａｒｇ－１的表达量在６ｈ时较高（ｔ＝９．３５，Ｐ＜０．０５）。Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ 检测 ＴＮＦｍＲＮＡ 相对表达量逐渐降低，ｉＮＯＳｍＲＮＡ 相对表达量在６ｈ时升高，之后降低；Ａｒｇ－１ｍＲＮＡ 相对表达量的相对表达量逐渐升高，４８ｈ时表达量升高尤为显著（ｔ＝４．２７，Ｐ＜０．０５）。 结论 弓形虫感染能诱导巨噬细胞表达 Ｍ２型细胞炎性因子，并抑制 Ｍ１型细胞因子的表达，可通过ＪＡＫ１－ＳＴＡＴ６信号通路调节人原代肺泡巨噬细胞向 Ｍ２型巨噬细胞偏移。