Functional Analysis of the EspR Binding Sites Upstream of espR in Mycobacterium tuberculosis
Functional Analysis of the EspR Binding Sites Upstream of espR in Mycobacterium tuberculosis
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结核分枝杆菌中 espR 上游 EspR 结合位点的功能分析
DOI：
10.1007/s00284-013-0404-8
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发表时间：
2013-06
影响因子：
2.6
通讯作者：
Pang, Xiuhua
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Howard, Susan T.;Zhang, Peipei;Hou, Guihua;Pang, Xiuhua
ESX-1分泌系统将底物蛋白输出到宿主细胞中，并且对于结核分枝杆菌的发病机制至关重要。EspR是表征的转录调节因子之一，其通过结合espA（EspA的编码基因）的启动子中的保守EspR结合位点来调节ESX-1系统，espA也是ESX-1系统的底物蛋白并且是ESX-1活性所需的。EspR是自身调节的，并且保守的EspR结合位点存在于EspR的上游。在这项研究中，我们发现这些EspR位点对EspR具有不同的亲和力，其中位点B是最强的一个。位点B处的DNA序列的点突变消除了EspR与单独含有位点B或含有其它位点的寡核苷酸的结合，进一步表明位点B是EspR的主要结合位点。互补研究表明，含有espR和上游基因间区的构建体完全恢复了ΔespR突变株中espR的表达。尽管在一个以上EspR位点具有突变的重组菌株显示espR表达的最小差异，但观察到其他EspR靶基因的表达降低，表明EspR水平的轻微变化可具有下游调节作用。这些发现有助于我们理解ESX-1系统的调节。
The ESX-1 secretion system exports substrate proteins into host cells and is crucial for the pathogenesis of Mycobacterium tuberculosis. EspR is one of the characterized transcriptional regulators that modulates the ESX-1 system by binding the conserved EspR binding sites in the promoter of espA, the encoding gene of EspA, which is also a substrate protein of the ESX-1 system and is required for the ESX-1 activity. EspR is autoregulatory and conserved EspR binding sites are present upstream of espR. In this study, we showed that these EspR sites had varying affinities for EspR, with site B being the strongest one. Point mutations of the DNA sequence at site B abolished binding of EspR to oligonucleotides containing site B alone or with other sites, further suggesting that site B is a major binding site for EspR. Complementation studies showed that constructs containing espR, and the upstream intergenic region fully restored espR expression in a ΔespR mutant strain. Although recombinant strains with mutations at more than one EspR site showed minimal differences in espR expression, reduced expression of other EspR target genes was observed, suggesting that slight changes in EspR levels can have downstream regulatory effects. These findings contribute to our understanding of the regulation of the ESX-1 system.
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MprAB 调节结核分枝杆菌中的 espA 操纵子并调节 ESX-1 功能和宿主细胞因子反应
影响因子：
3.2
作者：
Pang, Xiuhua;Samten, Buka;Howard, Susan T.
通讯作者：
Howard, Susan T.
影响因子：
2.8
作者：
Pang, Xiuhua;Vu, Phong;Howard, Susan T.
通讯作者：
Howard, Susan T.
DOI：
10.1073/pnas.0913551107
发表时间：
2010-03-16
影响因子：
11.1
作者：
Gordon, Blair R. G.;Li, Yifei;Liu, Jun
通讯作者：
Liu, Jun
影响因子：
3.6
作者：
Shaun B. Walters;E. Dubnau;I. Kolesnikova;F. Laval;M. Daffé;I. Smith
通讯作者：
Shaun B. Walters;E. Dubnau;I. Kolesnikova;F. Laval;M. Daffé;I. Smith
影响因子：
5.2
作者：
Buxton RS;Green J;Hunt DM;Kahramanoglou C;Stapleton MR;Sweeney NP
通讯作者：
Sweeney NP