过氧化氢诱导人肝癌细胞 BEL7402 产生氧化应激细胞模型的建立
过氧化氢诱导人肝癌细胞 BEL7402 产生氧化应激细胞模型的建立
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
王建华
中科院分区：
文献类型：
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作者：
文丽梅;卢帅;吕国栋;李亚芬;郑璇;田春艳;赵军;王建华
目的 研究过氧化氢(H 2 O 2 )构建体外人肝癌细胞 BEL7402 氧化应激模型的最佳作用浓度及时间。方法 采用噻唑蓝(MTT)染色法检测以10、100 和1 000 μmol/L 的 H 2 O 2 处理0、2、4、6、8、10、12 和24 h 后 BEL7402 细胞的存活率;采用双氢罗丹明 123(DHR123)探针法、单细胞凝胶电泳技术和分光光度法检测以 100 μmol/L H 2 O 2 处理 BEL7402 细胞4 h 后线粒体活性氧(ROS)含量、DNA 损伤、丙二醛(MDA) 含量、超氧化物歧化酶(SOD) 及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P X ) 活性。结果100 μmol/L H 2 O 2 处理 BEL7402 细胞 4 h 后，其存活率为(43. 44 ±5. 74)%，与 10 μmol/L H 2 O 2 处理组(92. 77 ±5. 51)% 相比，细胞存活率降低，差异有统计学意义(P ＜0. 01);ROS 含量结果显示 100 μmol/L H 2 O 2 处理 BEL7402 细胞 40 min 时其体内的ROS 含量达到峰值，之后呈下降趋势;与健康对照组比较，100 μmol/L H 2 O 2 组 OTM 值升高(P ＜0. 05)，MDA 含量升高，差异有统计学意义(P ＜0. 01)，SOD 和 GSH-Px 活性均下降(P ＜0. 05 或 P ＜0. 01)。结论 100 μmol/L H 2 O 2 、预处理4 h，可成功构建BEL7402 细胞体外氧化应激模型，可为通过氧化应激机制抗肝病新药的研发奠定基础。