加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠海马 miR-187 /Wnt /β-catenin 信号通路表达的影响

加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠海马 miR-187 /Wnt /β-catenin 信号通路表达的影响
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DOI:
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发表时间:
2023
期刊:
中华中医药学刊
影响因子:
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通讯作者:
刁丽梅
刁丽梅
中科院分区:
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文献类型:
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作者:
吕婷婷;李瑞暖;李洁玉;黄其柳;黄小妹;黄柳瑛;刁丽梅

文献摘要

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目的 探讨加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠 miR - 187 /Wnt /β - catenin 信号通路表达的影响。方法:制备匹罗卡品急性癫痫小鼠模型后,将小鼠随机分为模型组、加味柴胡疏肝汤组、卡马西平组、加味柴胡疏肝汤 + miR-187 过表达组、加味柴胡疏肝汤 + miR - 187 抑制组,每组 10 只,除模型组之外,其余组别分别给予相应药物灌胃进行干预,2次/d,连续 14 d。脑电图检测小鼠痫性波,苏木素 - 伊红染色法( hematoxylin - eosin staining,HE) 染色法进行正常组与模型组病理组织学观察,实时荧光定量聚合酶链式反应( Real - time PCR,RT - PCR) 检测小鼠海马组 β - catenin、cyclinD1、c - myc、wnt3 mRNA 表达水平,免疫蛋白印迹法( western blot,WB) 检测小鼠海马组织 β - catenin、cyclin D1、c - myc、wnt3 蛋白表达水平,免疫荧光检测小鼠海马组织 β - catenin、cyclin D1、c - myc、wnt3 的表达水平。结果 脑电图结果显示,与正常组相比,模型组小鼠脑电图观察到连续性痫性放电,表现为棘波、尖波、棘 - 慢综合波; 与模型组比较,加味柴胡疏肝汤组与卡马西平组均能减少癫痫小鼠脑电图痫性波次数; 与加味柴胡疏肝汤组比较,加味柴胡疏肝汤 + miR-187 过表达组小鼠脑电图中痫性放电次数明显减少,加味柴胡疏肝汤 + miR - 187 抑制组小鼠脑电图中痫性放电次数明显增加。RT - PCR 结果显示,与正常组相比,模型组 β - catenin、cyclin D1、c-myc 和 wnt3 基因表达显著升高; 与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和加味柴胡疏肝汤 + miR - 187 过表达组小鼠海马组织中 β - catenin、cyclin D1、c-myc 和 wnt3基因表达均明显减低,且较单纯使用加味柴胡疏肝汤组明显减低; 加味柴胡疏肝汤 + miR - 187 抑制组 cyclin D1 较模型组明显降低; 卡马西平组 β - catenin、cyclin D1、c - myc、wnt3 基因表达水平均明显降低。WB 结果显示,与正常组相比,模型组 β - catenin、cyclin D1、c - myc 和 wnt3 蛋白表达显著升高; 与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和卡马西平组小鼠海马组织中 β - catenin、cyclin D1、c - myc、wnt3 蛋白表达量均减低; 加味柴胡疏肝汤 + miR - 187 过表达组 β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3 蛋白表达量较模型组和加味柴胡疏肝汤组均明显减低; 加味柴胡疏肝汤 + miR-187 抑制组 c-myc、wnt3 蛋白表达量较模型组比均明显降低; 免疫荧光结果基本同 WB。结论 加味柴胡疏肝汤上调 miR-187 的表达,抑制 β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3 的表达,抑制癫痫的发生和发展。