REGULATION OF CLATHRIN ASSEMBLY AND TRIMERIZATION DEFINED USING RECOMBINANT TRISKELION HUBS
REGULATION OF CLATHRIN ASSEMBLY AND TRIMERIZATION DEFINED USING RECOMBINANT TRISKELION HUBS
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DOI：
10.1016/0092-8674(95)90167-1
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发表时间：
1995-10-20
期刊：
影响因子：
64.5
通讯作者：
BRODSKY, FM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
LIU, SH;WONG, ML;BRODSKY, FM
在胞吞作用和细胞器生物发生过程中，网格蛋白聚合成多面体囊泡外壳驱动细胞膜上的受体分选。为了研究网格蛋白的自组装，我们在细菌中表达了网格蛋白重链的c端三分之一。重组片段是三聚结合的网格蛋白轻链，在形态上类似于三螺旋形网格蛋白分子的中心结构域。重组枢纽的自组装证明了对网格蛋白轻链和三轴腿远端部分在网格蛋白外壳形成中的调节作用。该中心的删除突变定位了一个介导轻链结合和网格蛋白自组装的结构域，并绘制了一个可转移的三聚体结构域。这些研究明确了控制网格蛋白自组装的分子相互作用，并为未来的分析建立了重组系统。
Clathrin polymerization into a polyhedral vesicle coat drives receptor sorting at cellular membranes during endocytosis and organelle biogenesis. To study clathrin self-assembly, we expressed the C-terminal third of the clathrin heavy chain in bacteria. The recombinant fragment trimerized, bound clathrin light chains, and morphologically resembled the hub domain of the triskelion-shaped clathrin molecule. Self-assembly of recombinant hubs demonstrated a regulatory role for clathrin light chains and for the distal portions of triskelion legs in clathrin coat formation. Deletion mutagenesis of the hub localized a domain mediating light chain binding and clathrin self-assembly and mapped a transferable trimerization domain. These studies define molecular interactions controlling clathrin self-assembly and establish a recombinant system for future analysis.