基于HDAC6介导的自噬- 溶酶体途径探究温肾通督方对微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响
基于HDAC6介导的自噬- 溶酶体途径探究温肾通督方对微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响
复制标题
DOI：
10.7661/j.cjim.20220127.122
复制
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
杨一麟
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
吴承杰;马勇;郭杨;潘娅岚;刘孟敏;涂鹏程;杨光露;杨一麟
目的基于组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)6介导的自噬-溶酶体途径,探究温肾通督方影响微血管内皮细胞(MECs)吞噬髓鞘碎片的作用机制。方法通过CCK-8法检测温肾通督方冻干粉干预后MECs的增殖状态,筛选其最佳干预浓度;构建体外类血管结构,并建立髓鞘碎片与类血管结构共培养模型;将实验分为空白组(MECs)、模型组(MECs与髓鞘碎片共培养)、Tubastatin-A组(MECs与髓鞘碎片共培养+ HDAC6抑制剂Tubastatin-A)以及温肾通督方组(MECs与髓鞘碎片共培养+温肾通督方冻干粉),通过免疫荧光染色法检测MECs吞噬髓鞘碎片的情况,并利用激光共聚焦进行拍照分析;通过Western Blot法检测MECs微管稳定系统(HDAC6、Kinesin5、Dynein)及自噬-溶酶体途径(LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ、p62、Beclin1)相关蛋白的表达。结果免疫荧光结果表明,与模型组比较,Tubastatin-A组和温肾通督方组都可显著促进MECs吞噬髓鞘碎片(P0.05)。结论MECs吞噬髓鞘碎片会导致HDAC6的表达上调,但并不会影响MECs微管稳定系统及自噬-溶酶体途径;Tubastatin-A及温肾通督方均可通过抑制HDAC6的表达增强MECs微管系统的稳定,进而激活自噬-溶酶体途径,促进MECs吞噬髓鞘碎片。