A rapid and robust tri-color flow cytometry assay for monitoring malaria parasite development.
A rapid and robust tri-color flow cytometry assay for monitoring malaria parasite development.
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DOI：
10.1038/srep00118
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发表时间：
2011
影响因子：
4.6
通讯作者：
Renia, Laurent
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Malleret, Benoit;Claser, Carla;Ong, Alice Soh Meoy;Suwanarusk, Rossarin;Sriprawat, Kanlaya;Howland, Shanshan Wu;Russell, Bruce;Nosten, Francois;Renia, Laurent
吉姆萨染色的薄血涂片的显微镜检查仍然是用于量化和分期疟疾寄生虫的金标准方法。然而，这种技术很乏味，并且需要训练有素的显微镜人员。我们开发了一种快速、简单的流式细胞术方法，可以对全血或体外培养的恶性疟原虫中的红细胞中的各种疟原虫进行定量和分期。用二氢乙锭和 Hoechst 33342 或 SYBR Green I 对寄生虫进行染色，并用抗 CD45 的抗体鉴定白细胞。根据所使用的 DNA 染色剂，使用不同型号的流式细胞仪对样品进行分析。该方案不需要任何洗涤步骤，可以将受感染的红细胞与白细胞区分开，并可以识别未感染的网织红细胞和正常细胞。它还可以评估不同发育阶段的寄生虫的比例。最后，我们演示了如何将该技术应用于抗疟药物测试。
Microscopic examination of Giemsa-stained thin blood smears remains the gold standard method used to quantify and stage malaria parasites. However, this technique is tedious, and requires trained microscopists. We have developed a fast and simple flow cytometry method to quantify and stage, various malaria parasites in red blood cells in whole blood or in vitro cultured Plasmodium falciparum. The parasites were stained with dihydroethidium and Hoechst 33342 or SYBR Green I and leukocytes were identified with an antibody against CD45. Depending on the DNA stains used, samples were analyzed using different models of flow cytometers. This protocol, which does not require any washing steps, allows infected red blood cells to be distinguished from leukocytes, as well as allowing non-infected reticulocytes and normocytes to be identified. It also allows assessing the proportion of parasites at different developmental stages. Lastly, we demonstrate how this technique can be applied to antimalarial drug testing.
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影响因子：
2.2
作者：
Grimberg, Brian T.
通讯作者：
Grimberg, Brian T.
影响因子：
2.1
作者：
Izumiyama, Shinji;Omura, Mako;Asahi, Hiroko
通讯作者：
Asahi, Hiroko
DOI：
10.1073/pnas.0802982105
发表时间：
2008-07-01
影响因子：
11.1
作者：
Plouffe, David;Brinker, Achim;Winzeler, Elizabeth A.
通讯作者：
Winzeler, Elizabeth A.
DOI：
10.1002/cyto.990080606
发表时间：
1987-11-01
期刊：
CYTOMETRY
影响因子：
--
作者：
MAKLER, MT;LEE, LG;RECKTENWALD, D
通讯作者：
RECKTENWALD, D
DOI：
10.1007/bf01992046
发表时间：
1994-01-15
期刊：
EXPERIENTIA
影响因子：
--
作者：
ORJIH, AU;RYERSE, JS;FITCH, CD
通讯作者：
FITCH, CD