SFTS病毒感染脾脏网状成纤维细胞系的建立
SFTS病毒感染脾脏网状成纤维细胞系的建立
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DOI：
10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2018.04.015
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
柳燕
中科院分区：
文献类型：
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作者：
李嘉嘉;陈振;刘伯玉;Adams Latif;刘洋;李川;李阿茜;梁米芳;李德新;柳燕
目的分离、纯化、培养和永生化小鼠脾脏原代网状成纤维细胞(fibroblastic reticular cells, FRCs),筛选和鉴定永生化的FRCs克隆,证明永生化FRCs可用于SFTS病毒(SFTSV)体外感染研究。方法使用磁珠和流式细胞分选等技术分离、纯化和培养小鼠脾脏FRCs;使用SV40永生化FRCs,筛选单克隆并培养50代以上,使用转录组测序(RNA Sequencing, RNA-seq)和激光共聚焦技术对原代和永生化的FRCs进行比较和鉴定;用SFTSV体外感染的永生化的FRCs。结果成功得到4个永生化的FRCs克隆;鉴定结果显示Clone02符合FRCs表型,且纯度均达到了99% ;转录组测序相关性分析显示Clone02细胞株基因表达与原代FRCs接近;基因表达分析和激光共聚焦实验证实Clone02的表型和原代FRCs相同;SFTSV在MOI值0.5的条件下即可成功感染Clone02细胞。结论永生化的FRCs Clone02细胞保持了原代细胞的形态学、免疫学特征,与原代FRCs基因表达谱接近,可被SFTSV体外感染,是一个新的有潜力的SFTSV体外研究的细胞平台。