Vergleich der osteogenen Potenz gentechnisch modifizierter BMP
Vergleich der osteogenen Potenz gentechnisch modifizierter BMP
复制标题
成骨技术改良 BMP 的研究
DOI：
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发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
K. Würzler
中科院分区：
文献类型：
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作者：
R. Depprich;J. Handschel;W. Sebald;N. Kübler;K. Würzler
DAS BMP-2(骨形态发生蛋白-2)结合肝素结合蛋白是N-末端蛋白。在此基础上，对肝素和蛋白质的N-端序列进行了改造，并对其进行了分类。BMP-Varianten T3和T4在体内的骨形成能力和MIT rhBMP-2 Verglichen的体内评价。符合GDF-5-Mutante，B2GDF-5(GDF-5 Chimär)的Gleichzeitig sollte die OsteoInduktivität，以及N-终端顺序von BMP-2 BMP，überprüft。De Proteine Wurden auf equinen Kollagenträgern(EXKK-Träger)in 8 mm im DurchMesser groçe Schädeltrepanationsdefkte(“临界尺寸缺陷”)von Ratten implantiert(“临界尺寸缺陷”)。NAC28：Tagen erfolgte eine放射学和组织学Auswertung des gebildeten Knochens。De BMP-Varianten T3和T4 Zeigten eine deutlich Bessere Knochenbildung im Vergleich zu rhBMP-2，während sowohl GDF-5以及B2GDF-5 eine geringere Knochenbildung aufwiesen。De Mutante B2GDF-5 Zeigte eine Annähernd Gleiche Knochenbildung verglichen MIT GDF-5.在活体内进行肝脏绑定和骨形态发生蛋白-2的生物研究，直到L的Verweildauer am植入物分类和他妈的长期存在于Gewebe。在体内对BMP-2进行体内生物活性测定，发现骨质疏松症患者的骨质疏松症和骨质疏松症患者的骨质疏松症。通过改变骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的氨基酸序列来修饰肝素结合部位，导致局部保留时间的改变。本研究的目的是比较两个与肝素结合能力增强的突变体T3和T4以及B2GDF-5突变体B2GDF-5的体内成骨活性。B2GDF-5是BMP-2的N端氨基酸序列和GDF-5的C端序列与野生型BMP-2融合产生的突变体。将这些蛋白质偶联到马源性胶原载体上，并将其植入成年大鼠标准临界大小的颅骨缺损中。28天后，对骨形成进行放射学评估，并对新生骨进行组织学表征。蛋白T3和T4显示出比BMP-2更高的成骨活性。GDF-5和B2GDF-5组的新骨形成少于BMP-2组。GDF-5和B2GDF-5在骨形成方面没有差异。肝素结合能力增强BMP-2在体内的成骨活性。这可能是由于在组织中的保留期更长，因此生物利用度更好。将GDF-5的N端氨基酸序列替换为相应的BMP-2序列并没有导致成骨活性的增加，因为肝素结合能力不是GDF-5生物利用度的主要原因。
Das BMP-2 (bone morphogenetic protein-2) besitzt eine Heparinbindungsstelle am N-Terminus des Proteins. Durch die gezielte gentechnische Modifikation dieser N-terminalen Sequenz kann die Affinität des Proteins zu Heparin verändert und somit seine Verweildauer am Implantationsort beeinflusst werden. Die osteogene Potenz der BMP-Varianten T3 und T4 mit erhöhter Heparinbindung sollte in vivo evaluiert und mit rhBMP-2 verglichen werden. Gleichzeitig sollte die Osteoinduktivität der GDF-5-Mutante, B2GDF-5 (GDF-5 chimär), welche die N-terminale Sequenz von BMP-2 besitzt, überprüft werden. Die Proteine wurden auf equinen Kollagenträgern (EXKK-Träger) in 8 mm im Durchmesser große Schädeltrepanationsdefekte („critical size defect“) von Ratten implantiert. Nach 28 Tagen erfolgte eine radiologische und histologische Auswertung des gebildeten Knochens. Die BMP-Varianten T3 und T4 zeigten eine deutlich bessere Knochenbildung im Vergleich zu rhBMP-2, während sowohl GDF-5 als auch B2GDF-5 eine geringere Knochenbildung aufwiesen. Die Mutante B2GDF-5 zeigte eine annähernd gleiche Knochenbildung verglichen mit GDF-5. Die verstärkte Heparinbindung erhöht die biologische Aktivität von BMP-2 in vivo durch die längere Verweildauer am Implantationsort und die damit prolongierte Halbwertszeit im Gewebe. Ein Ersatz der N-terminalen Sequenz von GDF-5 durch die von BMP-2 bewirkt keine Veränderung der biologischen Aktivität in vivo, da trotz des verlängerten Verweilens im Gewebe die eigentliche Ursache für die geringere Osteoinduktivität nicht beeinflusst wird. Modification of the heparin binding site by alteration of the amino acid sequence of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) results in a change in the local retention time. The purpose of this study was to compare the osteogenic activity of T3 and T4, two mutants with increased binding capacity to heparin, and B2GDF-5 a mutant resulting from the fusion of the n-terminal amino acid sequence of BMP-2 and the c-terminal sequence of GDF-5 with wild-type BMP-2 in vivo. The proteins were coupled to an equine-derived collagen carrier and implanted in standardized critical size calvarial defects in adult rats. After 28 days, bone formation was evaluated radiographically and the new bone was characterized histologically. Proteins T3 and T4 showed a higher osteogenic activity than BMP-2. Less new bone formation was observed with GDF-5 and B2GDF-5 than with-type BMP-2. No difference in bone formation was observed between GDF-5 and B2GDF-5. Increased heparin binding capacity enhances osteogenic activity of BMP-2 in vivo. This might be due to a longer retention period in the tissue and thus better bioavailability. Replacement of the N-terminal amino acid sequence of GDF-5 by the corresponding sequence of BMP-2 did not result in an increased osteogenic activity as heparin binding capacity is not the main reason for the bioavailability of GDF-5.
重组人生长和分化因子 5 的诱导活性。
影响因子：
3.9
作者：
Spiro,RC;Liu,L;Heidaran,MA;Thompson,AY;Ng,CK;Pohl,J;Poser,JW
通讯作者：
Poser,JW