The Use of Xenopus laevis Oocytes for the Functional Characterization of Heterologously Expressed Membrane Proteins

The Use of Xenopus laevis Oocytes for the Functional Characterization of Heterologously Expressed Membrane Proteins
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使用非洲爪蟾卵母细胞进行异源表达膜蛋白的功能表征

DOI:
--
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发表时间:
2000
影响因子:
--
通讯作者:
S. Bröer
S. Bröer
中科院分区:
医学1区
文献类型:
--
作者:
C. Wagner;B. Friedrich;I. Setiawan;F. Lang;S. Bröer

文献摘要

参考文献

被引文献

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南非爪蛙X. laevis的卵母细胞被广泛用于异种蛋白的表达。特别是膜蛋白的功能表征已显著受益于该表达系统的使用。外源cRNA可以很容易地注射,并且可以通过多种技术研究蛋白质的表达和功能。这篇综述将简要概述各种适用的方法。它们涵盖了不同的电生理方法,如双电极电压钳,膜片钳和离子选择电极,细胞化学到蛋白质生物化学。尽管非洲爪蟾卵母细胞被广泛使用,但在解释蛋白表达结果时应谨慎。外源蛋白可能与内源蛋白相互作用,内源蛋白的功能背景可能相对较高,或者由于环境温度的差异或细胞环境的改变而改变蛋白质的行为。
The oocytes of the South African clawed frog X. laevis are widely used for the expression of heterologous proteins. The functional characterization of membrane proteins in particular has significantly profited from the use of this expression system. Heterologous cRNA can easily be injected and protein expression and function be studied with several techniques. This review will give a short overview into the variety of methods applicable. They span from different electrophysiological methods such as two electrode voltage clamp, patch clamp and ion-selective electrodes over cytochemistry to protein biochemistry. In spite of the wide usage of Xenopus oocytes, caution should be taken interpreting the results of protein expression. Heterologous proteins may either interact with endogenous proteins, the background of endogenous protein function may be relatively high, or altered protein behaviour may occur due to differences of the ambient temperature or altered cellular environment.
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