清心饮抑制 CVB3 感染心脏内皮细胞发生 EndMT 的作用机制研究
清心饮抑制 CVB3 感染心脏内皮细胞发生 EndMT 的作用机制研究
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
刘强
中科院分区：
文献类型：
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作者：
金信垚;俞燕;杨吕洪;刘强
目的 探讨清心饮含药血清通过调控 Pyk2-PI3K-AKT 信号通路抑制柯萨奇 B3 病毒( CVB3 )感染心脏微血管内皮细胞( CMVECs) 向间充质细胞转分化( EndMT) 的作用。方法 选取稳定培养的心脏 CMVECs，以 100TCID50CVB3 进行感染，采用 20% 清心饮含药血清进行干预( 期间设立 Pyk2抑制剂-TAE226 和 PI3K 抑制剂-LY294002 进行干预) 。通过免疫荧光( IF) 、蛋白质印迹( Western blot) 、聚合酶链式反应( PCＲ) 等实验方法检测内皮细胞标志物血小板/内皮细胞粘附分子-1(CD31) 和间充质细胞标志物 α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA) ，富含脯氨酸的酪氨酸激酶 2( Pyk2) 、磷脂酰肌醇 3 激酶( PI3K) 、蛋白激酶 B( AKT) 蛋白及基因的表达。结果 与空白对照组比较，模型组 CD31 蛋白表达下调，α-SMA 蛋白表达上调( P ＜ 0． 05) ，Pyk2，PI3K，AKT 蛋白均表达下调( P ＜.0. 05) 。与空白血清组比较，20% 清心饮含药血清组 CD31 蛋白表达上调，α-SMA 蛋白表达下调( P＜ 0． 05) ; Pyk2，PI3K，AKT 表达上调( P ＜ 0． 05) 。与 20% 清心饮含药血清组比较，Pyk2 抑制剂组PI3K，AKT 表达下调( P ＜ 0． 05) ，CD31 蛋白表达下调，α-SMA 蛋白表达上调( P ＜ 0． 05) ; PI3K 抑制.剂组 AKT 表达下调( P ＜ 0． 05) ，CD31 蛋白表达下调，α-SMA 蛋白表达上调( P ＜ 0． 05) ，而 Pyk2 表达无明显变化( P ＞ 0． 05) 。通过 PCＲ 亦发现，Pyk2，PI3K，AKT mＲNA 与 Western blot 法蛋白表达趋势一致。结论 20% 清心饮含药血清可通过调控 Pyk2-PI3K-AKT 信号通路抑制 CVB3 感染 CMVECs 发生 EndMT。