RPG: Towards the Crystal Structure of Replication Protein A

RPG:探索复制蛋白 A 的晶体结构

基本信息

  • 批准号:
    9708028
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.8万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
    Standard Grant
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1997-09-01 至 1999-02-28
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

9708028 Borgstahl This is a Research Planning Grant for Women Scientists and Engineers. Dr. Borgstahl will study the structure of replication protein A (RPA) by X-ray crystallography. RPA is essential to the maintenance and replication of DNA. The recombinant protein will be produced in E.coli and very pure protein samples will be obtained using the latest techniques and established protocols. A wide range of crystallization conditions will be explored to grow large well-ordered crystals. Three strategies will be used to obtain diffraction quality crystals: crystallization of intact yeast and human RPA; crystallization of RPA domains and subcomplexes; crystallization of a trimmed RPA heterotrimer. Once crystals are obtained, X-ray diffraction data will be collected in order to obtain a high resolution structure of the protein. Replication protein A is a fundamental molecule in metabolism and is essential for eukaryotic life. RPA is absolutely required for many DNA metabolic processes, including replication, nucleotide excision repair and homologous recombination. The elucidation of the three-dimensional structure of RPA should provide insight into how this protein interacts with DNA and how it functions in its essential multidisciplinary role in DNA metabolism. ***
小行星9708028 这是一项针对女科学家和女工程师的研究规划补助金。 Borgstahl博士将通过X射线晶体学研究复制蛋白A(RPA)的结构。 RPA对DNA的维持和复制至关重要。 重组蛋白将在大肠杆菌中生产,并将使用最新技术和既定方案获得非常纯的蛋白样品。 将探索各种结晶条件以生长大的有序晶体。 将使用三种策略来获得衍射质量晶体:完整酵母和人RPA的结晶; RPA结构域和亚复合物的结晶;修剪RPA异源三聚体的结晶。 获得晶体后,将收集X射线衍射数据,以获得蛋白质的高分辨率结构。 复制蛋白A是真核生物代谢的基本分子,是真核生物生命所必需的。 RPA是许多DNA代谢过程所必需的,包括复制、核苷酸切除修复和同源重组。 RPA的三维结构的阐明应该提供洞察这种蛋白质如何与DNA相互作用,以及它如何在DNA代谢中发挥重要的多学科作用。 ***

项目成果

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