Renale Claudine und ihre Interaktionen

这些上皮细胞通过一种典型的紧密连接（TJ）蛋白家族，即Claudinen的表达而形成。在TJ中，通过将Claudine与自身的Zellmembran（顺式）和Nachbarzellen（反式）膜的内部隔离物一起进行Wechselecting来估计Claudine，从而获得上皮细胞的渗透性。然而，在欣韦兹，克劳丁不仅仅是一个准居民运输，而是通过国际间的合作，也是一个规范的过境运输。这两个项目的目的是分析Claudine的顺式和反式相互作用，以及Claudins-16与Cl-Bestrophin的相互作用。该实验韦尔登一个infach-和doppelttransfizierten MDCK C7-Zellen durchgeführt和beinhalten Herstellung冯Claudin-Chimären durch Austausch des 2。Extrazellulären Loops，fluoresenzoptische Untersuchungen von YFP-bzw. CFP-markierten Claudinen und Gefrierbruch-电子显微镜下的显微镜下的显微镜分析。对Claudin-16和Bestrophin-Isoformen1和4的Wechselenchungzwischen的研究表明，它们的表达是不正常的。在MDCK-C7-Zellen中敲低（siRNA）Bestrophine，并在随后进行Claudin-16共表达。该功能的AUSTROKUNGEN aller untersuchten Interaktionen韦尔登elektrophysiologisch charakterisiert和quantitiziert。

Jedes Epithel zeichnet sich durch ein typisches Expressionsmuster von Claudinen, einer Familie von Tight Junction (TJ) Proteinen, aus. In den TJ bestimmen diese Claudine durch Wechselwirkung mit benachbarten Claudinen innerhalb der selben Zellmembran (cis) und der Membranen der Nachbarzellen (trans) die parazellulären Permeabilitätseigenschaften des Epithels. Zudem mehren sich die Hinweise, dass Claudine nicht nur den parazellulären Transport, sondern durch Interaktionen mit lonenkanälen auch den transzellulären Transport regulieren können. Ziel des Teilprojektes ist zum einen die Analyse der cis- und trans- Interaktionen nierentypischer Claudine, zum anderen die Aufklärung der Interaktion von Claudins-16 mit dem apikalen Cl-Kanal Bestrophin. Die Experimente werden an einfach- und doppelttransfizierten MDCK C7-Zellen durchgeführt und beinhalten die Herstellung von Claudin-Chimären durch Austausch des 2. extrazellulären Loops, fluoreszenzoptische Untersuchungen von YFP- bzw. CFP-markierten Claudinen und Gefrierbruch- Elektronenmikroskopischene Analyse der gebildeten TJ. Die Untersuchungen der Wechselwirkung zwischen Claudin-16 und den beiden Bestrophin-Isoformen 1 und 4 werden mittels Überexpression bzw. knock-down (siRNA) der Bestrophine in MDCK-C7-Zellen mit oder ohne Claudin-16-Coexpression durchgeführt. Die funktionellen Auswirkungen aller untersuchten Interaktionen werden elektrophysiologisch charakterisiert und quantifiziert.