SBIR Phase I: New Fluorescent Biosensors for Signaling in Living Cells

SBIR 第一阶段:用于活细胞信号传导的新型荧光生物传感器

基本信息

  • 批准号:
    1248138
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 14.94万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
    Standard Grant
  • 财政年份:
    2013
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2013-01-01 至 2013-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

This Small Business Innovation Research (SBIR) Phase I project will establish the feasibility of developing a genetically-encoded biosensor to monitor levels of cyclic adenosine monophosphate (cAMP), an important second messenger component of drug signaling pathways. Unlike existing FRET-based biosensors that depend upon energy transfer between two fluorescent molecules, this sensor will employ a single, circularly permuted fluorescent green protein. This green sensor can be coupled with differently colored biosensors for other second messengers to produce simultaneous readouts for multiple components of a signaling pathway that change when activated by a drug.The broader impact/commercial potential of this project is that multiplex, genetically-encoded assays reporting multiple cell signaling events would expand the depth of knowledge about signal transduction by improving information on the timing, location and pathway cross-talk in physiologically relevant tissues. These assays are homogenous, do not require multiple steps, or cell lysis. A growing trend in the pharmaceutical industry is screening in primary cell cultures, and genetically encoded assays are ideally suited for this. The technology to be developed in this proposal represents a new innovation in fluorescent live-cell assay and has strong potential to reduce the cost and improve the reliability of drug discovery to find safe and effective drugs that provide better treatment outcomes and improved human health.
这项小企业创新研究(SBIR)第一阶段项目将建立开发一种基因编码生物传感器的可行性,以监测环磷酸腺苷(cAMP)的水平,cAMP是药物信号通路的重要第二信使成分。不像现有的基于fret的生物传感器依赖于两个荧光分子之间的能量转移,这种传感器将采用单一的,循环排列的荧光绿色蛋白。这种绿色传感器可以与其他第二信使的不同颜色的生物传感器相结合,同时产生信号通路的多种成分的读数,这些成分在被药物激活时发生变化。该项目的更广泛的影响/商业潜力是,报告多种细胞信号事件的多重遗传编码分析将通过改善生理相关组织中时间、位置和通路串导的信息,扩大对信号转导的了解深度。这些检测是同质的,不需要多个步骤,也不需要细胞裂解。在制药行业的一个日益增长的趋势是筛选原代细胞培养,和遗传编码的分析是非常适合于此。本提案中开发的技术代表了荧光活细胞测定的一项新创新,在降低成本和提高药物发现的可靠性方面具有强大的潜力,从而找到安全有效的药物,提供更好的治疗效果,改善人类健康。

项目成果

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