Vitalitätserhaltende Markierung von Spermien mit einer Y-chromosomenspezifischen Gensequenz durch lasergenerierte Goldnanopartikel-Biokonjugate

使用激光生成的金纳米颗粒生物共轭物对精子进行 Y 染色体特异性基因序列的活力保存标记

• 批准号: 213561943
• 负责人: Professor Dr.-Ing. Stephan Barcikowski
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Nutztiergenetik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2011-12-31 至 2015-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/213561943?language=en
• 关键词: Vitalit; tserhaltende; Markierung; von; Spermien

Für die Markierung von Strukturen in vitalen Zellen sind Biomolekül-funktionalisierte Goldnanopartikel (GNP) Fluorochromen deutlich überlegen, da sie dank Plasmonenresonanz (PR)-Verstärkung bei unlimitierter Photostabilität schon in geringer Konzentration und niedriger Anregungsintensität detektiertbar sind. So ist die Detektion des Streulichtes einzelner Partikel möglich. Für das rationelle Design intrazellulärer Nanomarker ist das Wissen um den Einfluss sterischer und elektrochemischer Eigenschaften der GNP-Konjugate auf ihre Funktionalität (Affinität zur Zielstruktur, Membrangängigkeit) essentiell. Dies soll am Beispiel von GNP-markierten Oligonukleotidsonden zur In vivo-Markierung von Y-chromosomspezifischen Gensequenzen in Spermien systematisch erforscht werden. Dabei soll die Spezifität der Detektion durch Aggregation der GNP an spezifischen DNASequenzen erreicht werden, was eine bathochrome Verschiebung des Extinktionsspektrums durch PRKopplung auslöst. In Vorarbeiten wurden geeignete DNA-Zielsequenzen identifiziert und die Translokation der GNP durch die Spermienmembran belegt. Die Synthese der GNP erfolgt mittels Laserablation in Biomoleküllösungen unter Variation von Partikelgröße, Belegungsgrad und Zetapotenzial. Durch die Anpassung des GNP-Designs soll die Funktionalität der Sonde optimiert werden. Die entwickelten Zusammenhänge zwischen physikochemischen Eigenschaften der Biokonjugate und der Funktionalität im biologischen System sind beispielhaft und von grundlegender Bedeutung für die Weiterentwicklung auf Nanomarkern beruhender Identifizierungsverfahren.

Für die Markierung von Strukturen in vitalen Zellen sind BiomoleküL-Funktionalisierte金纳米粒子(GNP)Funktionalisierte金纳米粒子(GNP)deutlich ichüberlegen，da sie Dank PlmonenResonanz(PR)-Verstärkung beUnlimitierter Unlimtierter Schon in Geringer Konzentation and niedriger Anregungsint Siteät detektiertbar sind.《Streulichtes einzelner Partikel Möglich》也是如此。在GNP-Konjugate auf ire Funktionalität(Affinität zur Zielstrukut，MbrangänGigkeit)的基础上，设计Intra-zellulärer Nanomarker is das Wissen um den Eflifuss sterischer and Electric Chemischer Eigenschaften der GNP-Konjugate auhre Funktionalität(Affinität zur Zielstrukut，Mbra angänGigkeit)必不可少。在活体内标记的是Bispiel von GNP标记的寡核苷酸-Markierung von Y-染色体在精子系统中的基因序列。在GNP聚集期间检测到的是一种特殊的DNASEQUENZEN ERRIICDEN，这是一种特殊的颜色，是一种特殊的颜色。在Vorarbeiten Wurden geeignete DNA-Zielequenzen身份识别和GNP转换中，Spermienmenan Belegt。在Biomoleküllösungen，Belegungsgrad和Zetaptenzial的变化下，GNP错误的手套激光消融。Durch die Anpassung des GNP-Design soll die Funktionalität der Sonde Optimiert Widden.在生物和功能的生物系统和功能的基础上，生物化学和功能的生物化学系统将成为一种新的技术。