Konfokales Einzelmolekülfluoreszenzmikroskop mit alternierender gepulster Laseranregung und Multiparameter Fluoreszenz

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Der Antragsteller hat kürzlich das Nanopositionierungssystem (NPS) entwickelt, bei dem Informationen aus Einzelmolekül FRET Messungen, Kristallstrukturanalysen und Bayes’scher Datenanalyse verwendet werden um strukturelle und dynamische Informationen über transiente Protein-Nukleinsäurekomplexe zu erhalten... Um Arbeiten [auf dem Gebiet der Transkriptionselongation und Transkriptionsinitiation] erfolgreich weiterführen zu können ist es notwendig ein konfokales Fluoreszenzmikroskop mit Einzelmolekülsensitivität und hoher Zeitauflösung zu entwickeln. Hierbei soll durch Verwendung der Methoden der Pulsed Interleaved Excitation (PIE) und der Multiparameter Fluoreszenz Detektion (MFD) alle verfügbaren Informationen in drei unterschiedlichen spektralen Bereichen detektiert werden. Das Gerät wird ein wichtiger Meilenstein in der Weiterentwicklung von NPS auf drei Farben und höhere zeitliche Auflösung sein. Wichtige Anwendungen sind die Transkription in Eukaryoten und die Struktur und die Dynamik von Chromatin. Neben Messungen in-vitro sollen dabei auch Messungen in lebenden Hefezellen durchgeführt werden.