Molecular/genetic basis underlying the fish social vision

(1) メダカの全脳イメージング手法の確立：他者からの視覚刺激依存に活性化する脳領域を同定する目的で、カルシウムイメージングの実験系を確立した。遺伝子編集法を介したノックイン法により、神経マーカー遺伝子プロモータの下流でGCaMPを発現する遺伝子改変系統を作成した。プロモータの種類とGCaMPの組み合わせを変えた遺伝子改変系統を複数作成した結果、全脳でGCaMPを強く発現する系統を一系統得ることに成功した。この遺伝子改変メダカの稚魚に対して、スクリーン上に提示した視覚刺激を与えたところ、視覚刺激依存の神経活動を検出することに成功した。(2) メダカのバイナリー遺伝子発現システムの開発：これまでにTet-ONシステムがメダカでワークをすることを確認した。本年度はメダカでドライバー系統とレポーター系統を掛け合わせることで、任意の神経系に目的の遺伝子を薬物依存に発現誘導するシステムを構築した。神経系プロモータの下流で薬剤依存転写因子（rtTA)を発現するドライバー系統とTet プロモータ下流でGFP発現するレポーター系統を作成して両者を掛け合わせた結果、薬剤投与依存にGFPに発現誘導する系統を作成できた。(3) メダカを用いた光遺伝学の確立：メダカで光遺伝学の有効性を確認した。チャネルロドプシンを神経系に導入したノックイン系統を作出し、光依存な運動応答の誘発を確認した（Seki.et al., bioRxiv)。(4) 生育環境依存的な配偶戦略の変容の発見：異性がいない環境で育った性経験のないオスは、初めての性経験の相手となった特定のメスを認知し、積極的に求愛をすることを発見した。十分に性経験をしたオスはメスを見分けずに求愛するため、 生育環境によって、オスの認知能力または行動選択が変容することを発見した（Daimon.et al., Scientific reports)。

(1) メダカの全脳イメージング手法の確立：他者からの視覚刺激依存に活性化する脳領域を同定する目的で、カルシウムイメージングの実験系を確立した。遺伝子編集法を介したノックイン法により、神経マーカー遺伝子プロモータの下流でGCaMPを発現する遺伝子改変系統を作成した。プロモータの種類とGCaMPの組み合わせを変えた遺伝子改変系統を複数作成した結果、全脳でGCaMPを強く発現する系統を一系統得ることに成功した。この遺伝子改変メダカの稚魚に対して、スクリーン上に提示した視覚刺激を与えたところ、視覚刺激依存の神経活動を検出することに成功した。(2) メダカのバイナリー遺伝子発現システムの開発：これまでにTet-ONシステムがメダカでワークをすることを確認した。本年度はメダカでドライバー系統とレポーター系統を掛け合わせることで、任意の神経系に目的の遺伝子を薬物依存に発現誘導するシステムを構築した。神経系プロモータの下流で薬剤依存転写因子（rtTA)を発現するドライバー系統とTet プロモータ下流でGFP発現するレポーター系統を作成して両者を掛け合わせた結果、薬剤投与依存にGFPに発現誘導する系統を作成できた。(3) メダカを用いた光遺伝学の確立：メダカで光遺伝学の有効性を確認した。チャネルロドプシンを神経系に導入したノックイン系統を作出し、光依存な運動応答の誘発を確認した（Seki.et al., bioRxiv)。(4) 生育環境依存的な配偶戦略の変容の発見：異性がいない環境で育った性経験のないオスは、初めての性経験の相手となった特定のメスを認知し、積極的に求愛をすることを発見した。十分に性経験をしたオスはメスを見分けずに求愛するため、 生育環境によって、オスの認知能力または行動選択が変容することを発見した（Daimon.et al., Scientific reports)。