血液肝臓間相互作用を加味したミトコンドリア毒性評価系の構築と肝障害機序の解明

构建考虑血-肝相互作用的线粒体毒性评价体系并阐明肝损伤机制

• 批准号: 21J11187
• 负责人: 池山 佑豪
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J11187/
• 关键词: ミトコンドリア透過性遷移; 血小板; 薬物性肝障害; ミトコンドリア障害; 骨髄移植マウス

前年度は、骨髄細胞特異的にシクロフィリンD (MPT制御因子の1つ)欠損させたマウスを作製し、アセトアミノフェン投与による肝障害に関与することを示唆するデータを得ることができた。前年度の結果を基に本年度では、アセトアミノフェン肝障害発症過程に焦点を当てその機序を検証することを目的とした。まず初めに血小板でMPTが誘導されることを検証するため単離血小板を用いて血小板の活性化をフローサイトメトリーを用いて評価した。その結果、アセトアミノフェンの代謝物であるN-アセチル-p-ベンゾキノンイミン(NAPQI)を曝露によってMPT依存的な血小板の活性化を確認することができた。これはNAPQIがアセトアミノフェン肝障害の原因となる活性代謝物であることと矛盾しない結果である。次に血小板が肝臓で蓄積しているかを検証するため、骨髄移植マウスにアセトアミノフェンを投与し、1, 2, 6時間後に肝臓を単離し、浸潤した非実質細胞の割合を評価した。その結果、投与後1時間より有意に血小板数の増加が見られた。この増加は骨髄のシクロフィリンD欠損マウスでは観察されず、血小板のMPT誘導に起きている蓄積が示唆された。最後に肝実質細胞のMPT誘導に及ぼす影響を評価するためアセトアミノフェン投与後1, 2時間後の肝臓からミトコンドリアを単離しミトコンドリアの呼吸機能、膜電位並びにMPTへの影響を評価した。その結果、アセトアミノフェン投与群において呼吸機能・膜電位の低下そしてMPT誘導能の増加が確認できた。この影響は骨髄シクロフィリンD欠損マウスでは確認されなかった。以上より、アセトアミノフェン肝障害では発症過程に血小板のMPT誘導が血小板の肝臓への蓄積、そして肝ミトコンドリアMPT誘導能の上昇が起きることが示唆された。今後はマイクロアレイなどを用いて遺伝子変動を介した詳細な機序解明を進めていく予定である。

Before the annual は, bone marrow cell specific に シ ク ロ フ ィ リ ン D (MPT suppression factor の つ 1) owe loss さ せ た マ ウ ス を as し, ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン cast with に よ る liver handicap of に masato and す る こ と を in stopping す る デ ー タ を must る こ と が で き た. Before the annual の results を に this year で は, ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン liver handicap of に focus を 発 disease process when て そ の machine sequence を 検 card す る こ と を purpose と し た. Early ま ず め に platelet で MPT が induced さ れ る こ と を 検 card す る た め 単 from platelet を with い て platelet の activeness を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー を with い て review 価 し た. そ の results, ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン の metabolites で あ る N - ア セ チ ル - p - ベ ン ゾ キ ノ ン イ ミ ン (NAPQI) を exposure に よ っ て MPT dependent な platelet の activeness を confirm す る こ と が で き た. <s:1> れ がアセトア NAPQIがアセトア ノフェ ノフェ causes of liver impairment となる active metabolites である とと とと contradictory な である results である. Time に platelets accumulate が perforatien で liver し て い る か を 検 card す る た め, bone marrow transplant マ ウ ス に ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン を cast and し, 1, 2, 6 time after に routine liver を 単 し, infiltrating し た not be stromal cells の cut close を review 価 し た. Youdaoplaceholder0 そ results, 1 time after administration よ <s:1> intentionally increased に platelet count <e:1> が see られた. こ の raised は requirement by bone marrow の シ ク ロ フ ィ リ ン D owe loss マ ウ ス で は 観 examine さ れ ず, platelet の MPT inducing に き て い る accumulation が in stopping さ れ た. Finally に liver be stromal cells の MPT induced に and ぼ す を appraisal of 価 す る た め ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン cast and after 1, 2 time after の is crucial liver か ら ミ ト コ ン ド リ ア を 単 from し ミ ト コ ン ド リ ア の respiratory function, membrane potential and び に MPT へ の を appraisal of 価 し た. そ の results, ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン cast with group of に お い て, respiratory function of membrane potential, low の そ し て MPT can induce の raised が confirm で requirement by き た. The <s:1> <s:1> affects the <s:1> bone marrow シ ロフィリ ロフィリ ロフィリ ロフィリ D underdamage ウスで ウスで confirmation されな されな った った. Above よ り, ア セ ト ア ミ ノ フ ェ ン liver handicap of で は 発 disease process に platelet の MPT induced platelet の が routine liver へ の accumulation, そ し て liver ミ ト コ ン ド リ ア MPT inducing can rise が の き る こ と が in stopping さ れ た. Future は マ イ ク ロ ア レ イ な ど を with い て heritage 伝 - move を interface し た な machine sequence in detail explain を into め て い く designated で あ る.

项目成果

薬物性肝障害での骨髄由来細胞におけるミトコンドリア透過性遷移の関与

骨髓源性细胞线粒体通透性转变参与药物性肝损伤

• 发表时间: 2021
• 作者: 池山 佑豪;竹村 晃典;伊藤 晃成
• 通讯作者: 伊藤 晃成

ミトコンドリア膜透過性遷移を起点とした肝障害発症過程における血小板活性化の関与

从线粒体膜通透性转变开始血小板活化参与肝损伤发病机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 竹村 晃典;池山 佑豪;伊藤 晃成
• 通讯作者: 伊藤 晃成

ガラクトース培地と一過性低酸素を組み合わせによるミトコンドリア膜透過性遷移を加味した新規ミトコンドリア毒性評価系の構築

结合半乳糖培养基和短暂缺氧构建考虑线粒体膜通透性转变的新型线粒体毒性评价体系

• 发表时间: 2021
• 作者: 池山 佑豪;佐藤 智之;関根 秀一;竹村 晃典;伊藤 晃成
• 通讯作者: 伊藤 晃成

アセトアミノフェン肝障害発症における血小板でのミトコンドリア透過性遷移の関与の可能性

血小板线粒体通透性转变可能参与对乙酰氨基酚肝损伤的发生

• 发表时间: 2021
• 作者: 池山 佑豪;竹村 晃典;伊藤 晃成
• 通讯作者: 伊藤 晃成

Mitochondrial permeability transition of bone marrow derived cells was involved in acetaminophen-induced liver injury.

骨髓来源细胞的线粒体通透性转变参与对乙酰氨基酚诱导的肝损伤。

• 发表时间: 2021
• 作者: 池山 佑豪;竹村 晃典;伊藤 晃成
• 通讯作者: 伊藤 晃成