光受容体ドメインとイオンチャネルドメインを併せ持つ新奇膜タンパク質の機能動態解明

阐明具有光感受器和离子通道结构域的新型膜蛋白的功能动力学

• 批准号: 21J22755
• 负责人: 長坂 勇次郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J22755/
• 关键词: ロドプシン; ベストロフィン; パッチクランプ

メタゲノム解析からロドプシンドメイン（Rhドメイン）とベストロフィンドメイン（Bestドメイン）を併せ持つ新奇遺伝子（RhBest）が緑藻や渦鞭毛藻などに広く分布していることが分かった。Rhドメインに巨大なイオンチャネルであるベストロフィンが融合したタンパク質はこれまでになく、RhBestがどのようなイオン輸送に関わるのかをパッチクランプ法を用いた電気生理学実験により明らかにすることを研究目的とした。共同研究者であるイスラエル工科大学のOded Beja博士から提供された配列をもとに、緑藻または渦鞭毛藻由来の遺伝子コンストラクトを動物由来の培養細胞における形質膜発現に最適化した。次に、パッチクランプ法を用いて電気生理学実験を行ったところ測定したいずれのRhBestにおいても光電流は観測されなかった。その後可視光域の波長を変えながら光応答を確認したものの、いずれの波長の光にも応答しなかった。Oded Beja博士から新たに提供された海洋性藻類由来のRhBest遺伝子に関して高速液体クロマトグラフィー測定を実施した。その結果、暗条件では大半が発色団としてall-trans型レチナールが分子内に結合していることが確認された。さらに、赤色光照射によってall-trans型レチナールの割合の減少とともに11-cis型のレチナールが蓄積していることが新たに明らかになった。これはRhBestへの光照射によってall-trans型から11-cis型への光異性化反応が起こっていることを示唆しており、これまで微生物ロドプシンで起こるall-trans型から13-cis型への光異性化とは異なることが分かった。現在、申請者がHPLC測定を担当した海洋性藻類由来のRhBestに関する論文をNat. Struct. Mol. Biol.誌に投稿し受理された。

In addition, the distribution of green algae and dinoflagellates is also divided into two parts: the first part is the distribution of green algae and dinoflagellates. The purpose of this study is to investigate the relationship between the two factors and the relationship between the two factors. Co-investigator Dr. Oded Beja of the University of Technology provided information on optimization of plasma membrane development in cultured cells of animal origin. The method of electrophysiology is used to determine the best photoelectric current. The wavelength of the visible light domain is different from the wavelength of the visible light domain. Dr. Oded Beja provides a new method for determining the origin of marine algae. As a result, most of the dark conditions were identified by intramolecular binding. In addition, the red light irradiates the all-trans type of The light irradiation of RhBest-Trans-Type, 11-Cis-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type, 13-Cis-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type, 11-Cis-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type, 13-Cis-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type, 11-Cis-Type and Photo-Heterogeneous Reaction of RhBest-Trans-Type. Now, the applicant is responsible for determining the origin of marine algae. Struct. Mol. Biol. journal submission accepted.