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ラフィド藻類に由来するハロ酢酸前駆物質の特定に基づいたハロ酢酸の制御手法の開発

基于针藻类卤乙酸前体鉴定的卤乙酸控制方法的开发

基本信息

批准号：
21J23539
负责人：
多田悠人
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

水道水原中で散発的に増殖するラフィド藻類は，消毒副生成物であるハロ酢酸（HAAs）の前駆物質を高濃度で生成するため，水道水中のHAAs濃度上昇の原因となる。この前駆物質は高分子でありながら，極めて高い親水性を有し，通常の急速ろ過プロセスでの制御は困難である。従って，従来の特性解析だけでなくHAAs前駆物質の構造的特徴を解き明かした上で，その制御戦略を策定することが必要であり，これを本研究の最終目的とした。令和3年度は，まずラフィド藻Gonyostomum semen (G. semen）の培養条件の再検討と，大量培養手法およびHAAs前駆物質の効率的な抽出方法の開発を行った。G. semenの培養には，従来使用されてきたAF-6培地よりも，AF-6培地に含まれる栄養塩を環境水（琵琶湖水）に添加し作成した溶液の方が適していることが分かった。また，培養器を25 mL培養フラスコから300 mL三角フラスコにスケールアップしても同等に培養ができることを確認し，大量培養（20L以上）に成功した。さらに，HAAs前駆物質の抽出方法を以下の4工程に確立した: 1) 超音波による細胞の破砕，2) ろ過による細胞断片の除去，3) 限外ろ過（孔径，3 kDa）による脱塩と濃縮，4) 逆相-陽イオン交換カートリッジによる夾雑物質の除去。その後，精製した試料を液体クロマトグラム-精密質量計 (LC-Orbitrap/MS)による測定に供し，HAAs前駆物質の構造解明を試みた。その結果，糖とフェノールが結合した複数のフェノール配糖体が検出された。フェノール配糖体の一種であるアルブチンのHAAs生成能は十分に高く，これらがHAAs前駆物質の主要な部分構造として考えられた。

水道水源中弥散性的细菌发现了细菌生长的抑制因子，消除了副生成物腐殖酸（哈斯）前体物质高浓度下生成的腐殖酸，水道水源中的哈斯浓度上的原因腐殖酸。この前駆物質は高分子でありながら，極めて高い親水性を有し，通常の急速ろ過プロセスでの制御は困難である。因此，来不及特异性解析氢化物哈斯前物质氢化物制造的特异性引物，就无法解释氢化物上的差异，制定氢化物生成策略确定氢化物生成的必要条件，确定本研究的最大目的。令和3年生的，有丝分裂的卵囊线虫Gonyostomum semen（G.精液）稀释条件下再稀释，大量精子法提取哈斯前体物质可吸收率的精子提取方法进行了筛选。G.精液稀释剂、来用赋形剂AF-6陆地赋形剂、AF-6陆地赋形剂含有益生菌和益生菌的混合环境水（鸡胚水）添加剂组成的稀释液方赋形剂，可用于制备益生菌和益生菌。本品为浓缩液，浓缩器25 mL浓缩液，浓缩器300 mL三角形浓缩液。哈斯前体物质清除方法及以下4种工程方法建立：1）超声波破碎法清除癌细胞，2）超声波破碎法清除癌细胞片，3）有限外基质（微通道，3 kDa）酶切法清除癌细胞，4）液相-酶切法清除癌细胞片。氢化物歧化酶、精喹禾灵衍生物液相色谱-精密定量分析（LC-Orbitrap/MS）氢化物歧化定氮供试品、哈斯前体物质氢化物歧化酶制备明串珠菌。その結果，糖とフェノールが結合した複数のフェノール配糖体が検出された。乳糖苷配糖体是一种能够使乳糖苷哈斯生成能力达到十分之一的高分子，乳糖苷哈斯前底物主要是部分乳糖苷。