Inverses motorisiertes konfokales Fluoreszenzmikroskop

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Das beantragte Gerät soll der fluoreszenzbasierten, funktionellen und dynamischen Analyse von Proteinen in lebenden Säugerzelllinien dienen. Das Time correlated single photon counting (TCSPC) Modul wird für die Fluoreszenz-Lebenszeitmessung (FLIM) eingesetzt und ermöglicht die Charakterisierung der Nano-Umgebung von markierten löslichen und Membran-Proteinen. Damit kann die Re-Translokation von Proteinen überprüft werden. FLIM/FRET Messungen werden zur Detektion von Protein-Protein Interaktionen sowie makromolecular crowding genutzt. Die Verwendung pH-sensitiver GFP-Fusionsproteine erlaubt die Bestimmung des pH Wertes und über FLIM Messungen des örtlichen Refraktionsindex. Dies ist insbesondere für die Raum-zeitliche Analyse von mitochondrialen Atmungskettenkomplexen, die als Protonenpumpen fungieren, höchst aufschlussreich. Mehrfarben-Detektion ist obligatorisch für geplante Nutzung von ratio-meterischen Farbstoffen zur Aktivitätsbestimmung von Mitochondrien. Die Bestimmung der Lebenszeit von (mitochondrialen) Proteinen mittels alternder, fluoreszenter Sensoren soll über Emissionsmaxima-Verschiebungen und Fluoreszenz-Lebenszeit-Änderungen charakterisiert werden. Das Gerät wird eines der Hauptmessgeräte für die neuberufene AG "Zoologie und Molekulare Zellbiologie" sein und am IMZ auch anderen Gruppen für die Forschung zur Verfügung stehen.