プロテインホスファターゼPP2Cεが制御する小胞体ダイナミクスの機構解明

蛋白磷酸酶PP2Cε控制内质网动力学的机制

• 批准号: 21K05508
• 负责人: 荒井 斉祐
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05508/
• 关键词: 小胞体; Ppm1L; 小胞体ダイナミクス; Phosphatase; PPM1L

小胞体の構造は、主にタンパク質合成に関与する粗面小胞体と呼ばれるリボソームが付着したシート構造と、リボソームが付着していない滑面小胞体と呼ばれるチューブル構造からなる。この構造は、様々な細胞内外の環境に応じて劇的に変化するが、小胞体のチューブル構造の形成と伸長を制御する機構は不明な点が多い。小胞体に局在するProtein Phosphatase, Mg2+/ Mn2+ Dependent 1L (Ppm1L) は、小胞体上でpunctaを形成し、そのpunctaよりチューブ構造がよく形成される事を見出した事から、本研究では、Ppm1Lによる小胞体ダイナミクスの制御機構を解明する事を目的としている。Protein PhosphataseであるPpm1Lのターゲット分子は、リン酸化プロテオミクスを用いた解析により同定し、幾つかの小胞体タンパク質である分子に着目したが、そのどれもが、その分子のリン酸化状態に依存して小胞体の形態を変化させなかった。そこで、Ppm1Lに対するダイレクトなターゲット分子を同定する為、リコンビナントPpm1LとPpm1L KO株の粗抽出液を用いたin vitro酵素反応実験とリン酸化プロテオミクスを行った結果、WASH complex subunitの1つを候補として同定した。現在までに、この分子が、直接的にPpm1Lによって脱酸化される事をin vitro酵素反応で確認している。

The structure of the cell is mainly composed of two parts: one part is composed of two parts, the other part is composed of two parts. The structure of the cell is different from the environment inside and outside the cell. The structure of the cell is different from the structure of the cell. Protein Phosphatase, Mg2 +/Mn2 + Dependent 1L (Ppm1L), is present in the microsome, and the formation of puncta on the microsome, and the formation of puncta, and the structure of the microsome, are discussed in this study. Protein Phosphatase: Ppm 1L, p1L, p1L Ppm1L and Ppm 1L are the same molecules used in the crude extract of KO strain. Now, this molecule is directly deacidified in vitro enzyme reaction.

项目成果

Phosphorylation and subcellular localization of human phospholipase A1, DDHD1/PA-PLA1

人磷脂酶 A1、DDHD1/PA-PLA1 的磷酸化和亚细胞定位

• DOI: 10.1016/bs.mie.2022.07.011
• 发表时间: 2022
• 期刊: Methods in Enzymology
• 作者: Yamashita Atsushi;Matsumoto Naoki;Nemoto-Sasaki Yoko;Oka Saori;Arai Seisuke;Wada Ikuo
• 通讯作者: Wada Ikuo

Phosphorylation of human phospholipase A1 DDHD1 at newly identified phosphosites affects its subcellular localization.

• DOI: 10.1016/j.jbc.2021.100851
• 发表时间: 2021-07
• 期刊: The Journal of biological chemistry
• 作者: Matsumoto N;Nemoto-Sasaki Y;Oka S;Arai S;Wada I;Yamashita A
• 通讯作者: Yamashita A