权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Epidemiological clarifications and evaluation of the pathogenesis about novel zoonotic Campylobacter distributed among wild lives

野生动物中新型人畜共患弯曲杆菌的流行病学阐明及发病机制评价

基本信息

批准号：
21K05962
负责人：
壁谷英則
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05962/
关键词：
Campylobacter 野生動物鹿猪病原性

项目摘要

令和4年度は、2022年10月から2023年3月までを対象とし、15道府県の鹿170頭、5県の猪41頭の直腸便を供試した。各糞便1gを9mlのPreston培地に接種し、微好気条件下、37℃および42℃で48時間増菌培養後、mCCDA寒天培地およびスキロー血液寒天培地で微好気条件下、37℃および42℃で48時間分離培養した。純培養したコロニーからDNAを抽出し、PCR法で菌種を同定した。さらにPCR法によりChの細胞膨化致死毒(CDT)遺伝子chcdtⅠ、chcdtⅡの保有状況を検討した。鹿、猪由来Ch分離株の病原性解析のための予備的な検討として、Ch標準株を用いて、ヒト腸管上皮細胞株（caco-2細胞）への感染実験を行い、経上皮電気抵抗（ter）値を計測した。鹿の7頭(4.1%)、猪の20頭(48.8%)からそれぞれ27株、42株のCampylobacter属菌が分離された。分離株は全てChであった。鹿由来の22株（81.5％）、猪由来の17株(40.5%)はchcdtⅠ/Ⅱの両方を保有し、鹿由来2株（7.4％）、猪由来の9株(45%)はchcdtⅡのみを保有していた。令和4年度新たに、chcdtIBのみ陰性の株が鹿由来2株、猪由来10株、chcdtIA, IBのみ陰性を示す株が鹿、猪ともに1株、さらにchcdtIIA,IIB,IIC陰性株、chcdtIIB陰性株、chcdtIIA,chcdtIIC陰性株、chcdtIB, IIA, IIB, IIC陰性株、chcdtIB, IIB陰性株がそれぞれ1株づつ認められた。Ch標準株をcaco-2細胞に感染させたところ、MOI10で感染させ、48時間後にter値が65.1％まで減少したことを確認した。

170 deer from 15 provinces and 41 pigs from 5 provinces were tested in October 2022 to March 2023 1g of each feces was inoculated in Preston culture for 48 hours at 37℃ and 42℃ under mild ambient conditions, and mCCDA was isolated and cultured in cold air for 48 hours at 37℃ and 42℃ under mild ambient conditions. DNA isolation and identification by PCR in pure culture To investigate the status of chcdtⅠ and chcdtⅡ, the CDT gene fragments of Ch were detected by PCR. Preliminary study on pathogenicity analysis of Ch isolates from deer and pigs, evaluation of the infection status of Ch standard strains and intestinal epithelial cell lines (caco-2 cells), and measurement of ter 7 deer (4.1%), 20 pigs (48.8%) and 27 strains of Campylobacter were isolated. Isolates are all Ch. 22 strains (81.5%) of deer origin, 17 strains (40.5%) of pig origin, 2 strains (7.4%) of deer origin, 9 strains (45%) of pig origin and chcdt Ⅰ/Ⅱ. In 2004, there were 2 new chcdtIB negative strains from deer, 10 from pig, 1 chcdtIA, IB negative strain from deer, 1 pig, 1 chcdtIIA,IIB,IIC negative strain, chcdtIIB negative strain, chcdtIIA,chcdtIIC negative strain, chcdtIB, IIB, IIC negative strain, chcdtIB, IIB negative strain, 1 chcdtIB, IIB negative strain. Ch standard strain caco-2 infection, MOI10 infection, 48 hours later, 65.1% reduction