Bウイルス遺伝子搭載組換えHSVによるBウイルス解析ツール構築と神経病原性解析

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本研究の目的は、BSL4のウイルスであるBウイルスの遺伝子を、HSV-1またはHSV-2に組換えることにより、BSL2での解析を可能にすることである。この組換え体 を用いて、Bウイルス病の治療(薬剤開発)及び予防(ワクチン開発)に関わる薬剤感受性試験やチャレンジ試験の系の確立を図る。また、これまでほとんど明らか にされてこなかったBウイルスのヒトにおける神経病原性の機序を明らかにするものである。 本研究により、Bウイルスに対する薬剤やワクチンの開発に関する 研究や遺伝子の機能解析を、BSL2レベルで、in vitro及びin vivoで解析することが可能となる。 令和4年度は、前年度構築した、BウイルスのTK遺伝子を搭載した組換えHSV-1/BVTKの性状解析、また薬剤存在下(ACV及びGCV)で継代を繰り返すことにより、薬剤耐性変異体を作出し、その変異体のBVTKにおける変異部位の同定を試みた。組換えHSV-1/BVTKは、野生株と同等の増殖能を示し、また搭載されたBVTKの発現が確認された。薬剤感受性試験では、HSV-1よりもACV及びGCVへの感受性が低かった。薬剤存在下(ACV及びGCV)での継代により、元株(HSV-1/BVTK)と比較して薬剤に対する感受性が低下した(耐性を示した)数十のクローンを獲得した。今後、それぞれのクローンのゲノム上における薬剤耐性に関わる遺伝子変異部位を同定していく。