血管生物学研究のためのマウス胚生体イメージング系の確立

本研究計画は、発生過程における血管内皮細胞の動きを解明し、血管リモデリングの本質を定義することを目的とする。血管リモデリングはマウス (ほ乳類) 胚固有の現象であることから、マウス胚における血管形成過程のin vivoイメージング系を確立する。血管形成過程のin vivoイメージングは、より深部まで観察可能である二光子励起顕微鏡によるイメージング解析を適用する。二光子励起顕微鏡を用いたイメージング研究では、イメージングウィンドウと呼ばれる特殊な器具を装着し腹腔内の臓器を長期間にわたり観察する手法が確立されている。したがって、本研究計画では妊娠マウスにイメージングウィンドウを装着しマウス胚における血管内皮細胞の動きを経時的に観察・解析することで血管リモデリングの本質を定義する。2021年度はイメージングウィンドウを作製し、マウスにイメージングウィンドウを安定的に装着するための予備検討をおこなった。2022年度も前年度に引き続き、実験系の確立を中心に実施し、イメージングウインドウ等の実験器具の改良とイメージングウィンドウを装着したマウスを固定する固定台の作製を行った。また、血管内皮細胞のイメージングに必要なVE-cadherin-CreERT2マウスとR26R-tdTomatoマウスを掛け合わせたマウスは継続的に交配を続けており、イメージング条件の検討に必要なマウスの準備は整っていると言える。イメージングに必要な装置や道具は概ね揃ったことから、今後はイメージング条件の検討を進めていく予定である。

本研究計画は、発生過程における血管内皮細胞の動きを解明し、血管リモデリングの本質を定義することを目的とする。血管リモデリングはマウス (ほ乳類) 胚固有の現象であることから、マウス胚における血管形成過程のin vivoイメージング系を確立する。血管形成過程のin vivoイメージングは、より深部まで観察可能である二光子励起顕微鏡によるイメージング解析を適用する。二光子励起顕微鏡を用いたイメージング研究では、イメージングウィンドウと呼ばれる特殊な器具を装着し腹腔内の臓器を長期間にわたり観察する手法が確立されている。したがって、本研究計画では妊娠マウスにイメージングウィンドウを装着しマウス胚における血管内皮細胞の動きを経時的に観察・解析することで血管リモデリングの本質を定義する。2021年度はイメージングウィンドウを作製し、マウスにイメージングウィンドウを安定的に装着するための予備検討をおこなった。2022年度も前年度に引き続き、実験系の確立を中心に実施し、イメージングウインドウ等の実験器具の改良とイメージングウィンドウを装着したマウスを固定する固定台の作製を行った。また、血管内皮細胞のイメージングに必要なVE-cadherin-CreERT2マウスとR26R-tdTomatoマウスを掛け合わせたマウスは継続的に交配を続けており、イメージング条件の検討に必要なマウスの準備は整っていると言える。イメージングに必要な装置や道具は概ね揃ったことから、今後はイメージング条件の検討を進めていく予定である。