生体内免疫賦活分子GcMAFのマクロファージ活性化機構の解明

本申請研究である「生体内免疫賦活分子GcMAFのマクロファージ活性化機構の解明」は，これまでに明らかになっていないGcMAF（Gc-protein derived macrophage activating factor）のマクロファージ活性化の詳細な分子メカニズムを明らかにするものである。昨年度にGcMAF抗体と結合する分子Xの単離・同定に成功したため、本年度は分子XがGcMAFの活性制御に関与しているかを明らかにするために機能性評価を行った。マウス血中から分子X を精製しての評価を予定していたが，COVID19の影響で分離カラム成分の欠品が続いたため分離ができなかった。そこで、市販品の分子Xを用いGcMAFのマクロファージ活性化への影響を一酸化窒素(NO)産生量を指標に行ったが、分子XのGcMAF暴露によるマクロファージ活性化能は限定的であった。GcMAF抗体と反応する分子Xは炎症状態やマクロファージ活性化される時にのみ検出された分子であり、タンパク質の糖鎖修飾の違いが検出された要因であると考えている。そのため、市販品では糖鎖修飾が異なる結果、GcMAFへの効果が限定的であることが予想された。そこで現在、分子Xの糖鎖切断を行いGcMAF抗体に反応するかの確認を行っている。また、ようやく分離カラム成分の欠品が改善されたため、単離・精製した分子Xを用いてマクロファージ活性化への機能性評価を行っていく。

本申請研究である「生体内免疫賦活分子GcMAFのマクロファージ活性化機構の解明」は，これまでに明らかになっていないGcMAF（Gc-protein derived macrophage activating factor）のマクロファージ活性化の詳細な分子メカニズムを明らかにするものである。昨年度にGcMAF抗体と結合する分子Xの単離・同定に成功したため、本年度は分子XがGcMAFの活性制御に関与しているかを明らかにするために機能性評価を行った。マウス血中から分子X を精製しての評価を予定していたが，COVID19の影響で分離カラム成分の欠品が続いたため分離ができなかった。そこで、市販品の分子Xを用いGcMAFのマクロファージ活性化への影響を一酸化窒素(NO)産生量を指標に行ったが、分子XのGcMAF暴露によるマクロファージ活性化能は限定的であった。GcMAF抗体と反応する分子Xは炎症状態やマクロファージ活性化される時にのみ検出された分子であり、タンパク質の糖鎖修飾の違いが検出された要因であると考えている。そのため、市販品では糖鎖修飾が異なる結果、GcMAFへの効果が限定的であることが予想された。そこで現在、分子Xの糖鎖切断を行いGcMAF抗体に反応するかの確認を行っている。また、ようやく分離カラム成分の欠品が改善されたため、単離・精製した分子Xを用いてマクロファージ活性化への機能性評価を行っていく。