アンチセンス医薬品の細胞内送達に関与する分子群の機能解析

参与反义药物细胞内递送的分子的功能分析

• 批准号: 21K06468
• 负责人: 井上 貴雄
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06468/
• 关键词: 核酸医薬品; アンチセンス医薬品; 細胞内取り込み機構

近年、アンチセンスやsiRNAに代表される核酸医薬品の開発が進展しており、治療法のない遺伝性疾患や難治性疾患に対する次世代医薬品として注目を集めている。2023年5月現在、アンチセンス医薬を中心に17品目の核酸医薬品が上市されているが、その潜在的な課題として細胞内への送達効率が低い点が指摘されている。この課題に対して、オリゴ核酸を構成する核酸の化学修飾、オリゴ核酸の末端の修飾（脂質、糖などの付加）、送達キャリアの活用など、膜あるいは膜タンパク質との親和性を高める試みが行われているが、実用化の観点から更なる技術革新が望まれている。我々はこれまでに、アンチセンスの細胞内取り込みに関与する遺伝子を探索するために、「GFP発現細胞に対してGFP RNAを分解するRNA分解型アンチセンスを添加し、GFP蛍光をモニターするアッセイ系」と「スプライシング制御型アンチセンス(SSO)を用いたジストロフィン遺伝子の特定のエクソンのスプライスアウトを検出する系」の2種類のスクリーニング系を構築し、候補遺伝子群を特定し、膜タンパク質や細胞内輸送に関連するタンパク質など細胞内取り込みに関与する可能性のあると思われる遺伝子について、遺伝子破壊株及び過剰発現株の樹立を行ってきた。本年度は、昨年度に樹立した候補遺伝子の遺伝子破壊株及び過剰発現株の詳細な性状解析を行った。鎖長、配列の異なる様々なRNA分解型アンチセンスを用いてRNA分解能の効果を解析した結果、複数の遺伝子破壊株で全てのアンチセンスにおいて有効性が顕著に低下することが確認された。また、これらの遺伝子の過剰発現株においては、複数のアンチセンスのRNA分解活性の増大が観測された。

In recent years, the development of nucleic acid and siRNA represents the development of next-generation medical products, and the focus of attention on therapeutic methods for genetic and refractory diseases. In May 2023, the Center for Clinical Medicine reported that 17 nucleic acid drugs were marketed, and that the intracellular delivery rate was low. This subject is related to the chemical modification of nucleic acid, modification of terminal of nucleic acid (addition of lipid and sugar), utilization of delivery system, improvement of affinity of membrane and membrane, and improvement of technical innovation. We are looking for ways to increase the RNA fragmentation of GFP producing cells by detecting the RNA in the cells. Two types of GFP fluorescence detection system and two types of GFP fluorescence detection system, namely, GFP fluorescence detection system and GFP fluorescence detection system (SSO), are constructed and candidate gene subgroups are specified. The relationship between membrane quality and intracellular transport is discussed in detail. The relationship between membrane quality and intracellular transport is discussed in detail. This year, we have established a detailed analysis of the characteristics of candidate plants and emerging plants. The length, alignment and diversity of RNA decomposition types are used to analyze the effects of RNA decomposition, and the results of multiple RNA decomposition strains are confirmed. In addition, the increase in RNA decomposition activity of multiple RNA molecules was detected in the presence of these molecules.

项目成果

アンチセンス核酸のオフターゲット効果に対する塩基長の影響

碱基长度对反义核酸脱靶效应的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 横山匠;安東丈洋;堀内大輔;冨士大輔;山本美月;川上隆史;吉田徳幸,安原秀典,佐々木澄美,小比賀聡,井上貴雄
• 通讯作者: 吉田徳幸,安原秀典,佐々木澄美,小比賀聡,井上貴雄

次世代モダリティの 安全性確保に向けた取り組み

确保下一代模式安全的举措

• 发表时间: 2022
• 作者: 横山匠;安東丈洋;堀内大輔;冨士大輔;山本美月;川上隆史;井上貴雄
• 通讯作者: 井上貴雄

「新型コロナウイルスワクチン-広がるモダリティ-」New modalities for the COVID-19 vaccine

“COVID-19 疫苗的新方式”

• 发表时间: 2021
• 期刊: 学術の動向
• 作者: 井上貴雄;佐々木澄美
• 通讯作者: 佐々木澄美

核酸医薬品の安全性確保のためのオフターゲット作用の評価技術開発

开发脱靶效应评价技术保障核酸药物安全

• 发表时间: 2021
• 作者: Sugiura T;Habuchi T;Asada K;Yoshida T;Inoue T;Yamaguma H;Kasahara Y;Yamaguchi T;Obika S;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄;井上 貴雄
• 通讯作者: 井上 貴雄

次世代医薬とバイオ医療

下一代医学和生物医学

• 发表时间: 2022
• 作者: 長野 哲雄;川西 徹
• 通讯作者: 川西 徹