インクレチン関連薬による糖尿病の新たな個別化治療戦略

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近年、糖尿病における高血糖の原因として、インスリン作用の減弱以外に血糖を上昇させるホルモンの一つである、グルカゴンの分泌異常が注目されている。グルカゴンの分泌を抑制する作用が報告されている血糖降下薬として、インクレチン関連薬がある。しかし、インクレチン関連薬が実際にグルカゴンの分泌をどの程度抑制し、どの程度血糖コントロールに影響をおよぼしているかについては明らかになっていない。本研究では、インクレチン関連薬投与における血液中グルカゴン濃度の変動を解析することを目的とした。令和 4 年度は、分析に用いるペプチドおよび LC 条件、MS 条件などについて検討を行った。LC-MS/MS を使用して定量を行うにあたり、最適な内部標準としてされている安定同位体標識グルカゴンの合成を行った。血液検体に内部標準として安定同位体標識グルカゴンを添加することで、LC-MS/MS でのイオン化効率や分離・消化によるサンプル間のばらつきによる変動を補正することが可能となる。また LC-MS/MS で解析する前の処理として、免疫沈降法について検討した。様々な Protein A または Protein G 結合磁気ビーズを検討し、最適な結果が得られるビーズを検討している。また、グルカゴンを高い特異性で免疫沈降できる抗体についても検討している。令和 4 年度は血液検体を2 型糖尿病患者および健常ボランティアから採取するにあたり、倫理委員会の承認が得られたため、解析のための検体準備を進めている。