ペプチドミクスを用いた妊娠高血圧症候群早期診断マーカーの探索

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妊娠高血圧症候群 (HDP) は、5～7%の妊婦に発症する高血圧を主体とした疾患である。その重症化は、母体・胎児双方に重大な合併症の原因となる。HDPの病因・病態については、今なお、不明な点が多く、妊娠の中断以外には根治的な治療法がなく対症療法が中心である。その為、迅速な医療介入が発症及び病態悪化の抑制に重要である。しかし、現在、HDP発症を予知する有効な方法は無い。従って、本研究では、HDPの早期診断につながる有用な発症予知マーカーの創出を目的とし、血漿を対象としたペプチドの網羅的な解析を実施する。予備的検討及び前年度までに、HDP発症患者および非発症患者の少数血清試料を用いて血中ペプチドを対象としたペプチドミクス解析を行った。HDP血清で増減するいくつかのペプチド部分配列を同定し、有意な増加を示した血液凝固第V因子の部分配列1:VEVEQKと配列2:GLGCGKを同定した。しかし、第V因子の他の部分配列では有意な増加を示さなかった。本年度は、試料採取および解析手法の最適化に注力した。試料採取においては、所属大学医学部付属病院臨床検査部の全面的な協力を得ることが可能となり、多くの検体採取を可能とするプラットフォームを構築した。それに伴い、HDP発症患者および非発症患者の血液試料を血清から血漿試料へと変更した。解析手法の最適化においては、1.血漿試料を用いた分析の最適化、2.定量分析に用いるアイソバリックタグおよびタグを用いない分析法の最適化を行い、従来の質量分析法の1つであるショットガン法（Data dependent acquisition）に加え、MRM技術を応用したDIA（Data independent acquisition）法を用いることにより多くのタンパク質を同定可能とした、3.血漿中の遊離アミノ酸分析およびメタボロミクス解析の条件検討を行った。