Analysis of cell aging mechanisms through posttranslational modification-induced downregulation of proteasome activity

通过翻译后修饰诱导蛋白酶体活性下调分析细胞衰老机制

• 批准号: 21K06859
• 负责人: 木村 鮎子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Gunma Paz University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06859/
• 关键词: 老化; プロテアソーム; 翻訳後修飾; プロテオミクス; ユビキチン

研究代表者らはこれまで、タンパク質の選択的分解除去装置であるプロテアソーム複合体の脂質修飾が、長期培養され「老化」した酵母で減少し、プロテアソームの細胞内局在変化に伴う種々のストレス関連タンパク質の蓄積を引き起こし、酵母の高温・薬剤などへのストレス耐性を減少させることを明らかにしてきた。これらの知見から研究代表者は、老化細胞におけるプロテアソームの活性低下機構においても、脂質修飾を含む種々の翻訳後修飾の変化が関与すると予測し、集団倍加数 (PDL)の異なる2種類のヒト正常二倍体繊維芽細胞株, 胎児肺由来, TIG-1 (PDL=20: 若齢モデル細胞・PDL=60: 老化モデル細胞)から抽出したタンパク質を用いたユビキチン化タンパク質のウエスタンブロット解析および質量分析を行った。既報の通り、TIG-1-60細胞では細胞体積の増加に伴い一細胞あたりのタンパク質量の増加が見られ、さらにウエスタンブロット解析ではユビキチン化タンパク質シグナルの増加が見られた。また質量分析により、TIG-1-20細胞およびTIG-1-60細胞からそれぞれ450種類前後のタンパク質が検出された。TIG-1-20細胞特異的タンパク質群には、シグナル伝達や細胞の運動、核などに含まれるものが多いのに対し、TIG-1-60細胞特異的タンパク質群には、増殖を停止した線維芽細胞において発現増加することが知られているGAS6を含む老化関連タンパク質の他、ユビキチン化関連酵素やプロテアソームサブユニットのタンパク質、アルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患に関わるタンパク質などが含まれていた。

The research representatives are concerned about the degradation and removal of selected substances, lipid modification of yeast complexes, long-term culture, reduction of yeast aging, and intracellular transformation of yeast associated with the accumulation of substances, and reduction of yeast resistance to high temperature and solvent degradation. This knowledge is reflected in the research representative's observations on the relationship between aging cells, low activity mechanisms, lipid modifications, seed and post-translational modifications, and predictions of two types of normal diploid embryonic cell lines, fetal lung origin, TIG-1.(PDL=20: If the cell is aged·PDL=60: Aging cell) From extraction to quality analysis. It was reported that TIG-1-60 cells increased in cell volume, accompanied by an increase in cell mass. The quality of TIG-1-20 cells and TIG-1-60 cells was analyzed by mass spectrometry. TIG-1-20 cell-specific plastids include a variety of proteins that are involved in cell movement and nuclear development, TIG-1-60 cell-specific plastids include a variety of proteins that are involved in cell growth and development, and GAS-6 cell-specific plastids include a variety of aging-related proteins that are involved in cell growth and development. The disease is related to the quality of the brain.

项目成果

Phos-tag 対角線電気泳動を用いた血清中リン酸化タンパク質の解析法 の検討

Phos-tag对角线电泳分析血清磷酸化蛋白方法的研究

• 发表时间: 2021
• 作者: Ohira;T.;Y. Ino;Y. Kimura;Y. Nakai;A. Kimura;Y. Kurata;H. Kagawa;M. Kimura;K. Egashira;C. Matsuda;Y. Ohira;S. Furukawa;and H. Hirano;大川原佑季・木村 鮎子・林 由里子・平野 久・長田 誠
• 通讯作者: 大川原佑季・木村 鮎子・林 由里子・平野 久・長田 誠

Phosphorylation of Ser1452 on BRG1 inhibits the function of the SWI/SNF complex in chromatin activation

BRG1 上 Ser1452 的磷酸化抑制 SWI/SNF 复合物在染色质激活中的功能

• DOI: 10.1016/j.jprot.2021.104319
• 发表时间: 2021
• 期刊: Journal of Proteomics
• 影响因子: 3.3
• 作者: Kimura Ayuko;Arakawa Noriaki;Kagawa Hiroyuki;Kimura Yayoi;Hirano Hisashi
• 通讯作者: Hirano Hisashi