Regulation of virulence in fungi under coculture condition with anaerobic bacteria

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(1) Porphyromonas gingivalis (Pg) 培養上清によるCandida albicans (Ca)のバイオフィルム形成、病原性および薬剤感受性への影響Pg培養上清によるCaの菌糸形成およびバイオフィルム形成促進活性について、Caのクオラムセンシングよるバイオフィルム形成制御に影響を与える可能性について検討するために、バイオフィルム形成抑制作用を持つシグナル分子であるFarnesolをPg培養上清と同時に添加した際のCaのバイオフィルム形成について観察した結果、FarnesolはPg培養上清によるバイオフィルム形成を阻害しないことが明らかになった。菌糸形成の促進による細胞傷害性への影響について、Pg培養上清存在下で3時間培養後の菌体をHep-2細胞に感染させ、放出LDH活性の測定を行った結果、Caの細胞傷害性が増強することが明らかになった。薬剤感受性への影響については、Pg培養上清存在下で24時間培養した後にFLCZを添加した場合では菌の生存率が上昇する一方で、Pg培養上清とFLCZを同時に添加して培養した結果では、菌の生存率が逆に低下することが明らかになった。(2) Pg培養上清からのバイオフィルム形成促進活性画分の粗精製Pg培養上清に含まれるバイオフィルム形成促進活性について、Sep-Pak C18カラムによる精製を試みたが、分離することができなかった。そこで、Pg培養上清を限外濾過カラムを用いて分子量分画したのち、溶媒抽出法を用いてさらに分画し、活性の局在を確認したところ、低分子かつ高極性の分子を含む画分にバイオフィルム形成促進活性の存在が確認された。