バイオフィルムを介した胆管ステント閉塞メカニズムの解明

点击翻译按钮获取中文摘要

2021年4月より新規に8例の閉塞性黄疸患者の胆管ステントを回収した。８症例の各々のステントサンプルに対し嫌気培養・胆汁培養・胆泥培養およびバイオフィルム構造解析を実施した。培養では、Bacillus subtilis(8例中6例)、Enterococcus spp.(8例中5例)、Escherichia coli(8例中3例)が主要な構成菌として検出された。またバイオフィルム解析では異なる3種類の胆汁酸(コール酸、デオキシコール酸、リトコール酸)の環境下でバイオフィルム形成能に差が生じることがわかった。また様々な薬剤存在下でバイオフィルム形成能を比較し、特定の物質で胆管ステント内のバイオフィルム形成が抑制される可能性が示唆された。さらに、胆管ステント内の胆泥に対し16S rDNAアンプリコンシークエンスを行った。その結果、Lactobacillus（８例中５例）、Enterococcus（８例中７例）、Escherichia（８例中６例）、Klebsiella（８例中８例）と培養法の結果と矛盾がない結果が得られる一方で、Pyramidobacter（８例中４例）、Lactobacillus（８例中５例）、Fusobacterium（８例中６例）、Citrobacter（８例中４例）など培養法で検出されない菌が主要な菌として検出された。特にPyramidobacterは、同菌の相対的豊富度が50%を超える第一位菌種である症例であっても、培養法では検出されないといった結果の齟齬が確認された。また、蛍光顕微鏡による観察では、ステントの内腔中心付近にはPolysaccharideが充満する一方で、ステントの内側の表面に特異的に多く集合する菌が認められた。今後は、これらの菌の単離をすすめ、胆汁酸を含めた種々の環境下でバイオフィルム形成能を評価する予定である。