Examination of the therapeutic effect on inflammatory bowel disease using HSPB6-positive exosomes derived from amnion-derived MSCs

使用源自羊膜间充质干细胞的 HSPB6 阳性外泌体检查对炎症性肠病的治疗效果

• 批准号: 21K07952
• 负责人: 桂田 武彦
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07952/
• 关键词: 羊膜MSC由来エクソソーム; HSPB6; 炎症性腸疾患; 羊膜MSC; エクソソーム

羊膜由来間葉系幹細胞(MSC)は、骨髄、脂肪などに存在する体性幹細胞であり、骨、軟骨、脂肪などに分化する多 分化能を有し、再生医療における有望な細胞として注目されている。申請者らは、出産時に 廃棄される卵膜に着目し、その中の羊膜には多量のMSCが含まれていること、また、骨髄や 脂肪組織由来MSCと比較すると採取時の侵襲がないことから新規の再生医療ソースとして期待されている。これまでに我々は、複数の炎症性疾患動物モデルを用いて羊膜MSCの病態改善効果を明らかにしてきた。しかしながら、これまで羊膜MSCに由来するどのような物質がさまざまな炎症性疾患の病態を改善しているのかの詳細は明らかにされていない。今年度は、炎症細胞を用いたHSPB6過剰発現ならびにHSPB6欠損羊膜MSC由来エクソソーム処理後の炎症の評価を検討した。具体的には以下の通りに実施した。方法としては、作成されたHSPB6過剰発現エクソソームならびにHSPB6欠損エクソソームの炎症性評価を明らかにするために、マウス由来マクロファージを用いて、LPSの刺激後、エクソソームを処理し、産生される複数の炎症性サイトカインをELISAにて検証したところ、HSPB6過剰発現エクソソーム処理群では、LPS刺激後の炎症性サイトカインの発現が低下したほか、炎症性サイトカインの産生に重要な転写因子の活性化についてもHSPB6過剰発現エクソソーム処理群で低下していた。さらに、細胞内へのHSPB6の取り込み能を確認するために各エクソソームをラベル化し、エクソソームの細胞への取り込み能を顕微鏡下で観察したところ、標的細胞内に取り込まれていることが明らかとなった。これらにより、今年度予定していたHSPB6過剰発現エクソソームでは抗炎症効果の検証について予想通り十分な研究成果が得られた。

Origin amniotic mesenchymal stem cells (MSC) は, bone marrow, fat な ど に exist す る body sex cells で あ り, bone, cartilage, fat な ど に differentiation す る differentiation can have し を, regenerative medical に お け る could な cells と し て attention さ れ て い る. Applicants ら は, produce に 廃 abandon さ れ る serosa に mesh し, そ の の amniotic membrane in に は の MSC が contain abundant ま れ て い る こ と, ま た, bone marrow や adipose tissue origin MSC と compare す る と take の installed が な い こ と か ら new rules の regenerative medical ソ ー ス と し て expect さ れ て い る. こ れ ま で に I 々 は, plural の inflammatory disease animal モ デ ル を with い て amniotic MSC の pathological improvement unseen fruit を Ming ら か に し て き た. し か し な が ら, こ れ ま で amniotic MSC に origin す る ど の よ う な material が さ ま ざ ま な の inflammatory disease pathological を improve し て い る の か の detailed は Ming ら か に さ れ て い な い. Our は, inflammatory cells を い た HSPB6 before turning 発 now な ら び に HSPB6 owe damage of amniotic membrane MSC origin エ ク ソ ソ ー ム 処 の inflammation after Richard の review 価 を beg し 検 た. The specific に に and the following に are implemented through に and た. Methods と し て は, consummate さ れ た HSPB6 before turning 発 now エ ク ソ ソ ー ム な ら び に HSPB6 owe loss エ ク ソ ソ ー ム の inflammatory review 価 を Ming ら か に す る た め に, マ ウ ス origin マ ク ロ フ ァ ー ジ を with い て, LPS の stimulation, エ ク ソ ソ ー ム を 処 し, produce さ れ る plural の inflammatory サ イ ト カ イ ン を ELISA に て 検 card し た と こ ろ, HSPB6 turning 発 now エ ク ソ ソ ー ム 処 principle of で の は, LPS stimulation of inflammatory サ イ ト カ イ ン の 発 now low が し た ほ か, inflammatory サ イ ト カ イ ン の に great な planning write factor の activeness に つ い て も HSPB6 before turning 発 now エ ク ソ ソ ー ム 処 principle of low で し て い た. さ ら に, intracellular へ の HSPB6 の take り 込 み can を confirm す る た め に each エ ク ソ ソ ー ム を ラ ベ ル し, エ ク ソ ソ ー ム の cells へ の take り 込 み can を 顕 micro microscopically で 観 examine し た と こ ろ, target cells take り に 込 ま れ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ ら に よ り, our designated し て い た HSPB6 before turning 発 now エ ク ソ ソ ー ム で は anti-inflammatory unseen fruit の 検 card に つ い て to think り が very な research results have ら れ た.

项目成果

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