Analysis of role of YB1 in PD-L1 expression to develpe immune check point inhibitor therapy

分析YB1在PD-L1表达中的作用以开发免疫检查点抑制剂疗法

• 批准号: 21K08217
• 负责人: 水谷 泰嘉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08217/
• 关键词: PD-L1; YBX1; 肺がん; YB1; 免疫チェックポイント; mRNA安定性

本研究は、PD-L1（Programmed death 1 ligand 1）の発現制御におけるYBX1（Y box binding protein 1）の機能を明らかにすることである。これまでに、肺がん細胞株においてYBX1がPD-L1 mRNAの安定性を低下させることを明らかにしている。前年度の検証により、YBXによるPD-L1 mRNA不安定化には、intron retentionとは異なる機構が作用していることが考えられた。そこで、PD-L1 mRNAの3’-UTRを介したmRNA安定性におけるYBXの寄与を検証するために、3’-UTRをクローニングしてYBX1ノックダウン下でluciferase assayを行ったが、YBX1がPD-L1 mRNAの3’-UTRを介してmRNAを不安定化することを示す結果は得られなかった。そこで本年度は、3'RACE（Rapid amplification of cDNA ends）法を用いて、肺がん細胞株について、YBX1ノックダウン下におけるPD-L1 mRNAの3'-UTRの構造変化を、コントロール細胞と比較した。その結果、アガロースゲル電気泳動において、0.6kbpのプロダクトを主体とする複数のバンドが確認された。しかし、YBX1ノックダウン細胞とコントロール細胞の間に、泳動パターンの違いは認められなかった。0.6kbpのバンドについて、シーケンスを確認したところ、各クローンでPD-L1の3’UTRと相同な配列を検出した。しかし、コントロール細胞とYBX1ノックダウン細胞の間に特徴的な塩基配列の違いは認められなかった。以上の結果から、YBX1は今回検出されたPD-L1 mRNA 3'-UTRの領域を介して、mRNAの安定化に寄与する可能性が示唆された。

In this study, を and PD-L1 (Programmed death 1 ligand 1) <s:1> control the におけるYBX1 (Y box binding protein 1) <e:1> function を clearly ら にする にする とである とである. こ れ ま で に, lung が ん cell lines に お い て YBX1 が PD - L1 mRNA の low stability を さ せ る こ と を Ming ら か に し て い る. Card before annual の 検 に よ り, YBX に よ る PD L1 mRNA unrest to に は, exon) retention と は different な る institutions が role し て い る こ と が exam え ら れ た. そ こ で, PD - L1 mRNA の 3 'UTR を interface し た mRNA stability に お け る YBX の send を 検 card す る た め に, 3' UTR を ク ロ ー ニ ン グ し て YBX1 ノ ッ ク ダ ウ ン under で luciferase assay を line っ た が, YBX1 が PD - L1 The mRNA of 3 '-UTRを and <s:1> てmRNAを instability する られな とを とを showed that the す result was った られな った った った. そ こ で は this year, 3 'RACE (Rapid amplification of cDNA ends) method を with い て, lung が ん cell lines に つ い て, YBX1 ノ ッ ク ダ ウ ン under に お け る PD - L1 mRNA の 3' - UTR の structure - を, コ ン ト ロ ー ル cells と compare し た. そ の results, ア ガ ロ ー ス ゲ ル electric 気 swimming に お い て, 0.6 KBP の プ ロ ダ ク ト を subject と す る plural の バ ン ド が confirm さ れ た. し か し, YBX1 ノ ッ ク ダ ウ ン cells と コ ン ト ロ ー ル cells の に, swimming パ タ ー ン の violations い は recognize め ら れ な か っ た. 0.6 KBP の バ ン ド に つ い て, シ ー ケ ン ス を confirm し た と こ ろ, various ク ロ ー ン で PD - L1 の 3 'UTR と な with same column を 検 out し た. し か し, コ ン ト ロ ー ル cells と YBX1 ノ ッ ク ダ ウ ン cells between の に of 徴 な salt base with column の violations い は recognize め ら れ な か っ た. の above results か ら, YBX1 は today back 検 out さ れ た PD - L1 mRNA 3 '- UTR の field を interface し て, mRNA の stabilization に send す が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

YBX1 is a tuner to suppress PD-L1 expression in some lung cancer

YBX1 是一种抑制某些肺癌中 PD-L1 表达的调谐器

• 发表时间: 2022
• 作者: Yasuyoshi Mizutani;Toshiyuki Takeuchi;Atsuko Niimi;Siripan Limsirichaikul;Patinya Sawangsri;Tran Quoc Dat;Ken-ichi Inada;Tetsuya Tsukamoto;Masashi Kondo;Motoshi Suzuki
• 通讯作者: Motoshi Suzuki