B細胞遺伝子発現に基づく病原性形質芽細胞を標的としたSLEの新規治療法の開発

本研究の目的は、末梢血形質芽細胞におけるSLE患者と健常人間での発現変動遺伝子（in vivoマイクロアレイ)とBCRのみの刺激とBCR＋TLR9の共刺激間での発現変動遺伝子(in vitroマイクロアレイ)の比較に基づき、共通に上昇している遺伝子抽出し、それらの分子を特異的に標的する方法を開発（薬剤の探索）し、最終的にSLE形質細胞を特異的に標的とする治療法の開発につなげる。初年度の研究では、通常のB細胞刺激である抗BCR抗体＋CD40Lと病的B細胞（自己反応性B細胞）刺激を想定した抗BCR抗体＋CpG（TLR9のリガンド）あるいは抗BCR抗体＋R848 (TLR7/8のリガンド)の遺伝子発現をRT-PCRで定量し、in vivoマイクロアレイと比較した。当初は抗BCR抗体＋CpG＋IFNαによる刺激がもっともin vivoでのSLE形質細胞に特異的な遺伝子変化を反映すると考えていたが、CDC7、MEF2BなどのSLE形質細胞において特異的に上昇している遺伝子は抗BCR抗体＋R848＋IFNαによる刺激において特異的に上昇していた。また、CDC7阻害薬TAK-931が抗BCR抗体＋R848＋IFNαにより誘導される細胞分裂を著明に抑制したことを示した。R848, CpGを用いた形質芽細胞へ分化誘導する系（病原性B細胞の活性化系にあたる）は報告されているものの、これらのTLRのリガンドを用いないで形質芽細胞に分化誘導する系の報告はない。病原性B細胞の特徴的な遺伝子発現を検討するためには、非病原性B細胞の誘導系を樹立する必要がある。今年度はin vitroにおける病原性B細胞、非病原性B細胞から形質芽細胞へ樹立する系の樹立を試みた。

本研究の目的は、末梢血形質芽細胞におけるSLE患者と健常人間での発現変動遺伝子（in vivoマイクロアレイ)とBCRのみの刺激とBCR＋TLR9の共刺激間での発現変動遺伝子(in vitroマイクロアレイ)の比較に基づき、共通に上昇している遺伝子抽出し、それらの分子を特異的に標的する方法を開発（薬剤の探索）し、最終的にSLE形質細胞を特異的に標的とする治療法の開発につなげる。初年度の研究では、通常のB細胞刺激である抗BCR抗体＋CD40Lと病的B細胞（自己反応性B細胞）刺激を想定した抗BCR抗体＋CpG（TLR9のリガンド）あるいは抗BCR抗体＋R848 (TLR7/8のリガンド)の遺伝子発現をRT-PCRで定量し、in vivoマイクロアレイと比較した。当初は抗BCR抗体＋CpG＋IFNαによる刺激がもっともin vivoでのSLE形質細胞に特異的な遺伝子変化を反映すると考えていたが、CDC7、MEF2BなどのSLE形質細胞において特異的に上昇している遺伝子は抗BCR抗体＋R848＋IFNαによる刺激において特異的に上昇していた。また、CDC7阻害薬TAK-931が抗BCR抗体＋R848＋IFNαにより誘導される細胞分裂を著明に抑制したことを示した。R848, CpGを用いた形質芽細胞へ分化誘導する系（病原性B細胞の活性化系にあたる）は報告されているものの、これらのTLRのリガンドを用いないで形質芽細胞に分化誘導する系の報告はない。病原性B細胞の特徴的な遺伝子発現を検討するためには、非病原性B細胞の誘導系を樹立する必要がある。今年度はin vitroにおける病原性B細胞、非病原性B細胞から形質芽細胞へ樹立する系の樹立を試みた。