EMT阻害によるClaudin-low乳癌の活性化シグナル伝達経路の同定

EMT阻害剤の中で、TGF-β receptorⅠとTGF-β receptorⅡに 阻害作用のあるLY2109761がClaudin-low乳癌細胞を含めたトリプルネガティブ乳癌細胞に有効であったためEMT阻害剤としてはLY2109761を選択した。癌幹細胞の特徴をもつClaudin-low乳癌はCD44の発現がある。しかしながら、Claudin-low乳癌におけるCD44発現の意義はまだあまり明らかではない。一方でCD44はTGF-β receptorⅠとの間に相互作用があることは知られている。CD44の発現を低下させた場合、TGF-β receptorⅠ/Ⅱ阻害剤である LY2109761の効果がより高められるかどうかを調べるために、CD44の安定的ノックダウン細胞を作成した。MTTアッセイでCD44ノックダウンの効果とLY2109761の効果を調べたところ、SUM159とMDA-MB-231ともにCD44ノックダウンによって、LY2109761と同程度の細胞増殖抑制効果を認め、CD44ノックダウン細胞ではLY2109761の細胞増殖抑制効果がさらに高められていた。ウエスタンブロットでSmad2/3の発現はコントロールではLY2109761の有無で大きな変化は認められなかったが、CD44ノックダウンのよってSmad2/3の発現低下が軽度認められ、LY2109761の処理によってSmad2/3の発現が大きく低下した。これは、Claudin-low乳癌のCD44発現を低下させることができれば、TGF-β receptorⅠ/Ⅱ阻害剤をより効果的に作用させることができることを示唆している。

EMT阻害剤の中で、TGF-β receptorⅠとTGF-β receptorⅡに 阻害作用のあるLY2109761がClaudin-low乳癌細胞を含めたトリプルネガティブ乳癌細胞に有効であったためEMT阻害剤としてはLY2109761を選択した。癌幹細胞の特徴をもつClaudin-low乳癌はCD44の発現がある。しかしながら、Claudin-low乳癌におけるCD44発現の意義はまだあまり明らかではない。一方でCD44はTGF-β receptorⅠとの間に相互作用があることは知られている。CD44の発現を低下させた場合、TGF-β receptorⅠ/Ⅱ阻害剤である LY2109761の効果がより高められるかどうかを調べるために、CD44の安定的ノックダウン細胞を作成した。MTTアッセイでCD44ノックダウンの効果とLY2109761の効果を調べたところ、SUM159とMDA-MB-231ともにCD44ノックダウンによって、LY2109761と同程度の細胞増殖抑制効果を認め、CD44ノックダウン細胞ではLY2109761の細胞増殖抑制効果がさらに高められていた。ウエスタンブロットでSmad2/3の発現はコントロールではLY2109761の有無で大きな変化は認められなかったが、CD44ノックダウンのよってSmad2/3の発現低下が軽度認められ、LY2109761の処理によってSmad2/3の発現が大きく低下した。これは、Claudin-low乳癌のCD44発現を低下させることができれば、TGF-β receptorⅠ/Ⅱ阻害剤をより効果的に作用させることができることを示唆している。