膵島移植における免疫寛容誘導を目的とした細胞治療法の開発

开发旨在诱导胰岛移植免疫耐受的细胞疗法

• 批准号: 21K08635
• 负责人: 渡辺 正明
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08635/
• 关键词: 膵島移植; 免疫寛容; 細胞治療; 幹細胞移植

有効な免疫抑制細胞の誘導法の確立 有効な免疫抑制細胞の誘導法の開発。マウス脾細胞、抗CD80/CD86抗体、CTLA4-lg抗体を用いて、有効な細胞誘導条件を見出す。誘導細胞のphenotypeをFACSで検証し、ドナー抗原に対する免疫抑制効果を、MLRで検証し、 臨床膵島移植で応用可能な免疫抑制細胞誘導法を確立する。 誘導された免疫抑制細胞を膵島や、再生医療学的手法で誘導された細胞を、移植後の細胞傷害の主体であるマクロファージ(RAW 264.7cell)や、Kupffer細胞と共培養し、細胞傷害の指標となるHMGB1、マクロファージ・Kupffer細胞の活性変化(IL-6, IL-12, TNF-α産生)、炎症反応や細胞機能に関わる遺伝子を解析するとともに、免疫抑制細胞が移植膵島、炎症担当細胞へ与える影響を検討する。これまでの我々の研究に準じ、免疫抑制細胞を同種同系マウス膵島移植モデルのレシピエントに輸注し、移植後早期の膵島傷害に対する効果をin vivoで検討する。細胞移植モデルを用いた免疫寛容誘導の検証 齧歯類膵島移植モデルにおいて、免疫寛容誘導を検証する。誘導された免疫抑制細胞をマウスアロ膵島移植レシピエントに輸注し、移植膵島の生着期間延長効果を検証する。移植部位(肝臓)の炎症状態を、炎症サイトカイン発現(PCR)で検討し、さらにレシピエントの脾臓細胞を用いてMLR、IFN-g ELISPOT assayにて免疫抑制効果を検証する。大動物膵島移植モデルにおける免疫抑制細胞の有効な投与方法の検証臨床膵島移植は肝臓内移植が基本であるが、皮膚下、腎臓皮膜内など、他部位への移植も想定される。誘導された免疫抑制細胞の適切な投与方法、投与経路を検討する。

建立有效的方法来诱导免疫抑制细胞开发诱导免疫抑制细胞的有效方法。使用小鼠脾细胞，抗CD80/CD86抗体和CTLA4-LG抗体发现有效的细胞诱导条件。使用FACS验证了诱导细胞的表型，使用MLR验证了对供体抗原的免疫抑制作用，并建立了可以应用于临床胰岛移植中的免疫抑制细胞诱导方法。诱导的免疫抑制细胞与通过再生医学诱导的胰岛和细胞共培养，以及巨噬细胞（RAW 264.7CELL），移植后的细胞毒性和kupffer细胞的主体，并分析HMGB1，巨噬细胞和Kupffer细胞的活性变化（细胞毒性以及与炎症反应和细胞功能有关的基因，以及免疫抑制细胞对移植的胰岛和炎性细胞的影响。根据我们以前的研究，将免疫抑制细胞注射到同种异体小鼠胰岛移植模型的受体中，并在植入胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛胰岛的效果将在体内进行研究。使用细胞移植模型验证免疫耐受性诱导，我们将在啮齿动物胰岛移植模型中验证免疫耐受性诱导。将诱导的免疫抑制细胞注入小鼠Allo胰岛移植受体中，以验证延长移植胰岛植入周期的影响。使用炎症性细胞因子表达（PCR）检查植入物位点（肝脏）的炎症状态，并使用MLR和IFN-G ELISPOT测定法使用受体的脾细胞进一步验证免疫抑制作用。在大型动物胰岛移植模型临床胰岛移植中的有效给药方法的有效给药方法基本上是肝内移植，但也设想向其他部位移植到其他部位，例如皮肤下或肾膜中。将研究适当的给药方法和诱导免疫抑制细胞的给药途径。

项目成果

Operational tolerance induced by a donor antigen specific immunomodulatory cell therapy in living donor liver transplantation

活体肝移植中供体抗原特异性免疫调节细胞疗法诱导的操作耐受性

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉井大貴;菰原義弘;三上芳喜;升谷耕介．;Masaaki Watanabe
• 通讯作者: Masaaki Watanabe

Immunomodulatory Cell Induction for Tolerance after Pancreatic Islet Transplantation

胰岛移植后免疫调节细胞诱导耐受

• 发表时间: 2023
• 作者: Funakoshi S;Satoh A;Maeda T;Kawazoe M;Ishida S;Yoshimura C;Tada K;Takahashi K;Ito K;Yasuno T;Nakashima H;Mukoubara S;Fujii H;Okutsu S;Kawanami D;Nabeshima S;Kondo S;Fujita M;Masutani K;Arima H;Agustina Forgioni
• 通讯作者: Agustina Forgioni

臓器移植における免疫寛容

器官移植中的免疫耐受

• 发表时间: 2022
• 作者: Watanabe M;Fuji A;Tokushima S;Uemoto,K;Ueno M;Shimomura Y;Ito K;Yasuno T;Masutani K;Saito T.;渡辺正明
• 通讯作者: 渡辺正明