メタボローム解析によるKupffer細胞代謝を標的としたNASH肝細胞癌の治療

利用代谢组分析治疗针对 Kupffer 细胞代谢的 NASH 肝细胞癌

• 批准号: 21K08720
• 负责人: 廣川 文鋭
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08720/
• 关键词: 非アルコール性脂肪性肝炎; 肝細胞癌; Kupffer細胞; NASH; メタボローム解析

近年、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）の罹患率が上昇している。一部のNASHから肝細胞癌が発症することがとくに問題であるが、その発症機序は未だ不明であり、本邦で承認されている肝細胞癌の治療薬も一剤のみで開発に乏しい。また、様々な癌腫の発癌過程において、マクロファージのM1型からM2型への分極化が注目されており、新たな治療標的として期待されている。本研究では、肝特異的マクロファージであるKupffer細胞をNASH肝より分離し、Kupffer細胞の分極化に伴う代謝産物変化を明らかにすることを目的としている。本年度は、動物モデル飼育に長期間を要するためin vitro実験を中心に行った。マウス由来Kupffer細胞株であるKUP5にLipopolysaccharide(LPS)を導入し分極化実験を行った。LPSを導入した細胞を回収しWestern Blotting法で解析したところ、M1型マクロファージマーカーであるCD86の上昇およびM2型マクロファージマーカーであるCD163・CD206の発現低下を認め、LPS導入によりM1型に分極することを確認した。さらに、同サンプルにおいて糖代謝経路の律速酵素であるPKM2の発現変化を確認することができた。また、発癌前のマウスNASHモデル（C57BL/6J-NASH）ではM1マーカー遺伝子（CD86・CD80）の発現上昇およびM2マーカー遺伝子（CD163・CD206）の発現低下を認め、NASH肝ではM1型マクロファージが増加していることが示唆された。今後は、この動物モデルを長期飼育し発癌を確認したうえで上記と同様にマクロファージの分極化の確認を行う。

In recent years, the incidence of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) has been increasing. Some NASH patients develop hepatocellular carcinoma (HCC), and the mechanism of HCC development is unclear. We acknowledge that there is a lack of development in HCC treatment. In the process of cancer development, the M1-type and M2-type polarization of cancer cells are observed and new therapeutic targets are expected. The aim of this study is to clarify the role of Kupffer cells in NASH liver isolation and in the differentiation and metabolism of Kupffer cells. This year, the animal breeding center is in the middle of the year. Kupffer cell line Kupffer cell line Western Blotting method was used to analyze the rise of CD86 and the decline of CD163 and CD206 in LPS introduced cells. The expression of PKM2 was confirmed in the same way as in the glucose metabolism pathway. NASH (C57BL/6J-NASH), M1-type gene (CD86·CD80), M2-type gene (CD163·CD206), M1-type gene (CD86·CD80) and M2-type gene (CD163·CD206) were detected before cancer development. In the future, the animals will be bred for a long time to confirm the existence of cancer.