小胞体ストレス応答を司る長鎖ノンコーディングRNA　革新的治療への展開

控制内质网应激反应的长链非编码RNA——创新治疗的开发

• 批准号: 21K08733
• 负责人: 市原 もも子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Sapporo Medical University (2022)Osaka University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08733/
• 关键词: LncRNA01534; 小胞体ストレス

小胞体ストレス応答は、ホメオスタシスの維持や癌細胞の生存に重要であるが、小胞体ストレス応答と長鎖ノンコーディングRNA (long non-coding RNA, 以下 lncRNA) の関係性はほとんど明らかではない。私達はプロテアソーム活性が低下して幹細胞様性質を示す大腸癌細胞ではlncRNA LINC01534が過剰発現していること、またLINC01534の高発現は大腸癌の予後不良と関連することを見出した。2021年度はLINC01534のノックダウン(KD)によって、大腸癌細胞株HCT116とRKOの増殖抑制と細胞周期のG2/M arrestが起きることを見出した。更に、LINC01534 KDにより小胞体ストレス応答に働くリン酸化eIF2α、ATF4といったPERK経路の構成分子の蛋白発現が亢進すること、更にGlutamine-free, Glucose-freeとした飢餓状態においてはLINC01534のノックダウンで一層小胞体ストレス応答作用が増強されることを見出した。2022年度にはLINC01534の局在をin situ hybridizationによって検討し、LINC01534は大腸癌の間質ではなく癌細胞で高発現していることが明らかにした。 LINC01534 KDによって、細胞浸潤能・運動能の低下とアポトーシス誘導を確認できた。小胞体ストレス誘導剤であるThapsigarginによって小胞体ストレス応答は活性化し、癌幹細胞性は低下した。LINC01534 KDにより、癌幹細胞性質が低下することをスフェアー形成能、５種のステムマーカー発現、上皮分化マーカー発現、抗癌剤 (5-FU) 感受性試験によって確認した。これらの所見から、LINC01534は癌幹細胞性とストレス応答を逆に制御するkey分子である可能性が考えられた。

The relationship between microcellular RNA (long non-coding RNA) and microcellular RNA is important for maintaining the survival of cancer cells. Low levels of DNA activity and stem cell properties in colorectal cancer cells indicate that high levels of DNRNA LINC01534 are associated with future adverse effects of colorectal cancer. In 2021, LINC01534 (KD) cells were found to inhibit the proliferation of colorectal cancer cell line HCT116 and RKO and to initiate G2/M arrest. In addition, LINC01534KD increases protein expression of molecules constituting the PERK pathway, and Glutamine-free, Glucose-free protein expression increases in LINC01534KD. In 2022, LINC01534 was found in situ hybridization, and LINC01534 was found in colorectal cancer stroma. LINC01534 KD test, cell infiltration energy, exercise energy reduction, and induction were confirmed. Cell stem cells are activated by Thapsigargin, and cancer stem cells are inhibited by Thapsigargin LINC01534 KD test, cancer stem cell formation ability, 5 kinds of stem cell development, epithelial differentiation development, anti-cancer agent (5-FU) susceptibility test confirmation. LINC01534 is a potential inhibitor of cancer stem cell properties.