間葉系幹細胞による気管支の修復メカニズムの解明　iPS細胞による気管支断端瘻予防

利用间充质干细胞阐明支气管修复机制利用iPS细胞预防支气管残端瘘

• 批准号: 21K08885
• 负责人: 坂本 晋一
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08885/
• 关键词: iPS細胞; 気管支断端瘻; 間葉系幹細胞

気管支修復過程において間葉系幹細胞の役割を観察するため気管吻合モデル(8-0ナイロンで全周吻合し皮下に埋没する(完全吻合モデル)、気管を1針だけ吻合し右胸部皮下に埋没する(不完全吻合モデル))・脱細胞化モデルで間葉系幹細胞が創傷治癒に寄与するかどうかの観察を行った。昨年度、免疫染色で組織中に予想された細胞(間葉系幹細胞、炎症細胞)を確認することができなかったため、positive Marker(STRO-1,CD13等)を用いて解析を進めた。その結果、間葉系幹細胞の遊走を確認することができた。よって、間葉系幹細胞は気管支修復治癒を促進するセルソースである可能性が示唆された。その結果を踏まえて、マウス由来の骨髄由来間葉系幹細胞を気管吻合モデルに投与し創傷治癒効果の検証を行った。当初、気管埋没時に骨髄由来間葉系幹細胞をDMEMで懸濁し1×106で吻合部に局所注入した群(間葉系幹細胞群)、骨髄由来間葉系幹細胞から作成したシートを吻合部に巻き付けた群(シート群)、吻合部にDMEMのみを注入した群(コントロール群)の3群で解析を行う予定であった。骨髄由来間葉系幹細胞シートの作成はM.Nakao等(Stem Cell Res Ther 2019 Vol. 10 )の報告をもとに作成を試みているが、シートの作成に難渋している。気管縫合部に巻きつけられるほどの面積があるシートの作成を達成することができていないため、まずは骨髄由来間葉系幹細胞を投与した群のみで解析を開始した。コントロール群との比較のみしかできていないが、間葉系幹細胞の増殖を確認することができた。

During the repair process of vascular branches, mesenchymal stem cells were observed in the following ways: vascular anastomosis (8-0), full circumference anastomosis (perfect), vascular anastomosis (1), right chest subcutaneous (incomplete), decellularization (decellularization), wound healing (wound healing). In the past year, immunostaining was used to identify cells (mesenchymal stem cells, inflammatory cells) and positive markers (STRO-1, CD13, etc.). The results showed that mesenchymal stem cells migrated and were confirmed. The possibility of stem cell repair and healing in mesenchymal stem cells is discussed. The results showed that the stem cells derived from bone marrow were closely related to wound healing. Initially, when the tube was buried, mesenchymal stem cells from the bone marrow were suspended in DMEM to 1×106. The three groups were analyzed: the group injected into the anastomosis part (mesenchymal stem cell group) and the group made from mesenchymal stem cells from the bone marrow. The preparation of stem cells derived from mesenchymal stem cells was reported by M.Nakao et al.(Stem Cell Res Ther 2019 Vol. 10 ). The area of the suture part of the tube was determined by the analysis of mesenchymal stem cells. Comparison of stem cell populations and identification of mesenchymal stem cell proliferation