Elucidation of the cancer microenvironment for the development of STAS in lung adenocarcinoma as a fundamental of the development of markers for pathological search and preoperative diagnosis

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１）肺腺癌の新たな浸潤様式であるtumor spread through air space (STAS)が近年、独立予後不良因子として注目されている。病理検索・予後予測に有用なバイオマーカーの開発を端緒として、「STASの発生・進展とその背景にある癌免疫微小環境との関連性」の解明をすることが本研究の目的である。令和3・4年度において単一細胞RNA-seq法による擬似的時系列解析を使って、腫瘍構成細胞個々においてSTASの発生・進展に伴い遷移する遺伝子発現を測定し癌免疫微小環境の変化をモデル化することを目指して研究に着手した。当初計画では、患者腫瘍、近傍正常部由来の病理診断前の「新鮮無凍結」組織についてSTASの有無を自前のマーカーで確認後、各々およそ8000細胞を単離しscRNA-seqを実施することを予定していた。今年度、そのための準備を進めていたところ、トランスクリプトーム情報の取得技法について、より良い複数の選択肢が相次ぎ利用可能となる状況変化が生じ再検討を行った。その結果、STAS細胞の存在が既に明らかなパラフィン包埋組織切片を用いて、組織中のレアなSTAS本体細胞の遺伝子発現情報をより確実に捕捉できるうえ、組織病理像との正確な対応づけが可能となる空間トランスクリプトーム解析技術の利用へと計画変更することにした。現在、この解析に必要なスライド作製方法の検討を終え、使用する病理サンプルの選定中である。データ取得後の解析方針に変更はない。２）病理診断前の「新鮮無凍結」組織からRT-qPCR法によりSTASの有無を確認するための最終的なマーカー選定を終え、現在論文として投稿準備中である。1)の技法変更により本研究で利用の必要はなくなったが、これらマーカーからSTASの有無による腫瘍微小環境の違いに関する示唆を得ることができ、現在免疫組織化学による検証を進めている。