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Elucidation of endothelial cell function by visualization of Gel Form using intravital fluorescence microscopy

使用活体荧光显微镜观察凝胶形式来阐明内皮细胞功能

基本信息

批准号：
21K08929
负责人：
鵜澤康二
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

敗血症や大量出血などの重症病態に直面した患者の集中医療管理に関して、世界的に未解決な重要課題である。申請者は「血管の内皮細胞機能に効果的な治療が存在しないこと」「ベットサイドにて末梢循環をリアルタイムにモニターができないこと」が臨床に重大な問題であると捉えている。本研究は、重症病態下で核心的役割を果たす血管内皮上層のグリコカリックス（GCX）に注目し、生体蛍光顕微鏡下での微小循環環境の観察によって、GCX層の障害/修復過程を解明することを目的とする研究である。2021年度の実験計画は敗血症、大量出血、開腹手術モデルの3モデルを実験系の確立が大きな柱であった。2021年度前半で開腹手術モデルの腹部観察窓(ACW)の実験系を確立し、それぞれの病的状態のGCXを観察する計画であった。2022年度の実験計画では、各種薬剤 (HES、ビタミンC、FFP、アルブミン、Vit C)のGCXへの影響のpilot studyを行う計画であった。しかし、ACWの開発に非常に難渋し、開発が大幅に遅れており、実験が計画通りに進まなかった。一方、マウスFFPの精製やマウスアルブミンの精製は順調に行い、パイロット実験の準備は計画通りに進行している。しかし、ACWの開発は、本研究課題の中心であり、必ず達成しなければならないと考え、申請者は、chamberモデルや末梢循環観察技術の開発法などの技術と知識の習得のために、渡米した。渡米期間の延長に伴い、日本での本研究課題は一時的に中断した。しかし現在までに大まかなACWは完成した。申請者が帰国後に、さらにACWを改良し、計画していたpilot studyを行い、研究の遅れを取り戻し、各種薬剤のGCXへの影響に関して、ESLの厚さ、syndecan-1濃度、トロンボモジュリン濃度等を計測し、ESLの障害修復過程を解明する予定である。

Blood poisoning, massive bleeding, severe illness, and intensive medical management of patients are important unsolved problems in the world. The applicant responded that "the treatment of vascular endothelial cell function has a significant effect" and "the treatment of peripheral circulation has a significant clinical problem." The purpose of this study is to investigate the effects of core dissection on vascular endothelial cell (GCX) in severe disease and to elucidate the damage/repair process of GCX layer by observing the microcirculatory environment in vivo under microscope. In 2021, the implementation plan for blood poisoning, massive bleeding, and open surgery was established. In the first half of 2021, the implementation system of abdominal cavity examination (ACW) for open surgery was established, and the status of abdominal cavity examination (GCX) was planned. The 2022 implementation plan is to implement the pilot study plan for the impact of various agents (HES, VIS C, FFP, ARL C, VIT C) on GCX. ACW's development is extremely difficult, and the development is largely due to the fact that the project is progressing. A party, FFP refinement, FFP refinement, FFP preparation, FFP preparation, FFP, FFP The development of ACW is the focus of this research project. It must be achieved. The applicant must be able to develop the technology and knowledge of the end-cycle inspection technology. This research topic is interrupted by the extension of rice transit period and Japan. The ACW is now complete. The applicant shall conduct pilot study on the improvement of ACW, study on the selection, measurement of the influence of various agents on GCX, measurement of ESL thickness, syndecan-1 concentration, and concentration of organic pollutants, and determination of ESL damage repair process.