肺胞上皮細胞の自然免疫応答を標的とした院内肺炎予防法開発に向けた基盤研究

旨在开发针对肺泡上皮细胞先天免疫反应的医院肺炎预防方法的基础研究

• 批准号: 21K09027
• 负责人: 柏木 静
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09027/
• 关键词: 肺炎; 免疫応答; 免疫; 肺胞上皮細胞

本研究の目的は，肺炎等によって肺で炎症が生じた後の肺胞上皮細胞の自然免疫応答の変化について，その背景にある分子機構を明らかにし，免疫応答を正常化させることで院内二次肺炎の新規予防法の開発につなげることである。2022年度には，2021年度の結果を踏まえ，マウスにリポポリサッカライド（LPS）を気管内投与することによって肺に炎症を起こした後に，いくつかのタイミングで二回目のLPS気管内投与を行った際の免疫応答の解析を行った。しかしながら，タイミングによって白血球遊走，ケモカイン分泌，組織傷害といった変化が減弱，あるいは増強するといった様々な異なるパターンが観察され，実験系が安定しなかった。これを踏まえ，最初の肺への炎症刺激として，LPSではなく人工呼吸によるストレッチを加えた上で，その後の免疫応答を解析・検討するという方針に切り替え，そのための肺胞上皮細胞のストレッチ培養系の確立を行なうこととした。最初に，マウス肺胞上皮細胞株MLE12細胞をストレックス社の細胞進展システム上で培養するために，専用チャンバーのコーティング等の条件検討を行い，コラーゲンコートによって安定した細胞培養を行なうことができることを確認した。また，専用チャンバー上から細胞を生きたまま単離できることも確認しており，今後，この培養系を用いて，ストレッチ刺激が肺胞上皮細胞の自然免疫応答にどのような影響を与えるのか，またその分子機構について検討を行なう予定である。

The aim of this study was to investigate the changes in the natural immune response of pulmonary epithelial cells after the onset of pneumonia and other inflammatory diseases, and to normalize the immune response in the context of molecular mechanisms, and to develop new rules for the prevention of secondary pneumonia in hospitals. In 2022, the results of 2021 showed that the immune response analysis of LPS was carried out after the onset of pulmonary inflammation. The white blood cell migration, secretion, tissue damage and transformation are weakened, and the system is stable. The initial inflammatory stimulation of lung tissue was induced by LPS, and the subsequent immune response was analyzed and discussed. The establishment of lung epithelial cell culture system was carried out. Initially, the lung epithelial cell line MLE12 was cultured in vitro, and conditions such as culture conditions were discussed to confirm the stability of cell culture. In the future, this culture system will be used to stimulate the natural immune response of lung epithelial cells.